文档介绍：FSPYL027 饮料霉菌和酵母菌含量的测定平板计数法

F_SPYL027
饮料—霉菌和酵母菌含量的测定—平板计数法

1 范围
本方法采用平板计数法进行饮料中霉菌和酵母菌含量的测定。
本方法适用于饮料中霉菌和酵母菌含量的测定,以每克或每毫升饮料所含霉菌和酵母菌
的个数报告结果。
2 原理
饮料检样经处理,在适当的培养基和 25~28℃条件下培养,通过平板计数报告结果。
3 试剂
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)
成分
马铃薯(去皮切块) 300g
葡萄糖 20g
琼脂 20g
蒸馏水 1000mL
制法
将马铃薯去皮切块,加 1000mL 蒸馏水,煮沸 10~20min。用纱布过滤,补加蒸馏水至
1000mL。加入葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121℃高压灭菌 20min。
孟加拉红培养基
成分
蛋白胨 5g
葡萄糖 10g
磷酸二氢钾 1g
硫酸镁(MgSO4· 7H2O)
琼脂 20g
1/3 000 孟加拉红溶液 100mL
蒸馏水 1000mL
氯霉素
制法
上述各成分加入蒸馏水中溶解后,再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素,加入
培养基中,分装后,121℃灭菌 20min。
高盐察氏培养基
成分
硝酸钠 2g
磷酸二氢钾 1g
硫酸镁(MgSO4· 7H2O)
氯化钾
硫酸亚铁
氯化钠 60g
蔗糖 30g
琼脂 20g
蒸馏水 1000mL
制法
1
加热溶解,分装后,115℃高压灭菌 30min。必要时,可酌量增加琼脂。
灭菌蒸馏水
乙醇
4 设备和材料
温箱,25~28℃
振荡器
平天
显微镜
玻塞三角瓶,300 mL
试管,15 mm×150 mm
平皿,直径 9 cm
吸管,1 mL 及 10 mL
酒精灯
载物玻片
盖玻片
广口瓶
牛皮纸袋,121℃灭菌 20 min
金属勺、刀等
试管架
接种针
橡皮乳头
5 操作步骤
采样:取样时须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采
样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶,金属刀或勺等。在卫生学调查基础上,采取有代表性的
样品。样品采集后应尽快检验,否则应将样品放在低温干燥处。
以无菌操作称取检样 25 g(或 25 mL), 放入含有 225 mL 灭菌水的玻塞三角瓶中,振摇
30 min,即为 1:10 稀释液。
用灭菌吸管