文档介绍：实验六、植物组织中总糖和还原性糖含量的测定
1、实验目的
掌握总糖和还原糖含量的测定方法
2、实验重点和难点
利用蒽酮比色法测定还原糖含量的实验原理
多糖在浓硫酸加热条件下会降解为还原糖
3、实验原理
、还原糖的概念
指含有游离的半缩醛(酮)基糖。单糖都是还原糖;某些二糖是还原糖(如麦芽糖、乳糖等);多糖多为非还原糖。
葡萄糖分子中含有游离醛基,果糖分子中含有游离酮基,乳糖和麦芽糖分子中含有游离的醛基,故它们都是还原糖。
、蒽酮比色法
总糖的提取及双、多糖的酸水解。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量。
单糖类遇浓硫酸时,脱水生成糠醛衍生物,后者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物,在可见光620nm处有最大吸收,,故可比色定量。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖含量,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应),所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值。
相对密度法
折光法
旋光法
物理法
、糖含量测定方法
化学法
还原糖法
碘量法
比色法
直接滴定法
(改良的兰—爱农法)
高锰酸钾法
萨氏法

3,5—二硝基水杨酸
酚—硫酸法
蒽酮法
半胱氨酸—咔唑法
纸色谱
薄层色谱
GC
HPLC
β—半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖
葡萄糖氧化酶测葡萄糖
发酵法——测不可发酵糖
重量法——测果胶、纤维素、膳食纤维素
色谱法
酶法