文档介绍：山东师范大学
硕士学位论文
花生基因组噬菌体文库的构建及种子贮藏蛋白Arachin基因上游
序列的克隆
姓名:王晓云
申请学位级别:硕士
专业:发育生物学
指导教师:毕玉平
20060510
础么学⋯�「咨罢腿�筘,:¨�;����海畆�簪�篽圳�何鳎篒一�ㄈ蔴独学位论文版权使用授权书�汗汇�创声明川』㈨�拧��别木川究一乃讳、硐��俊発自�U郏何襧�妇��炯�酥����╦�簕以畅、���、女出¨�贿蛄���他人已经发表或撰。;过昀删‘氕』戊粜泼白』㈨帅�8檀↗�。叫的仆卜�川火示【射卷。�不包舍为获得�颉籧他毂��角�А��;�林萆搿�献均��㈠仑卫�一:�骷叭〉玫�文中不包含其��褂霉�哪�了明确的说明水学似论疋�弦籐仝��学校有父俅日�⑹勾ā����篿�.��娑ǎ�腥ū�俐行向刚家柏关郫����龟战宦賘“��复印�:痛�盐,允许�亍谏┎樵暮徒柙摹�水人��,�R�洞��目‘。�付芘.�騄卜。,�,�荩簀�~荇��人��簀��:�』���‘检索,�。�来删::≥印、。衙州’二’女㈡柑���皘��弧�\�小⑼”��堵偈贰�纵‘的学位沦文存晰南后通川小授楸��⒎睯‘��乓籭‘≯,:的掌�匕�穥几:�����拌�紃��.。一�輋木�����ⅲ喝��、
花生基因组噬菌体文库的构建及种子贮藏蛋白������上游序列的克隆摘要其是在进行特异表达和诱导表达时,表达水平大多不够理想。基因表达的空间性��蛄薪岷鲜亲钪匾5牡骺鼗�疲�丫�な导钢掷丛从诓煌�肿拥鞍谆��’山东师范大学硕士学位论文外源基因表达量不足往往是得不到理想的转基因植物的重要原因。由于启动子在决定基因表达方面起关键作用,因此,选择合适的植物启动子和改进其活性是增强外源基因表达首先要考虑的问题。目前在植物表达载体中广泛应用的启动子是组成型启动子,例如,绝大多数双子叶转基因植物均使用����舳�樱�プ右蹲;�蛑参镏饕J褂美醋杂�米的�����舳�雍屠醋运�镜腁���舳�印T谡庑┳槌尚捅泶锲舳�拥�控制下,外源基因在转基因植物的所有部位和所有的发育阶段都会表达。然而,外源基因在受体植物内持续、高效的表达不但造成浪费,往往还会引起植物的形态发生改变,影响植物的生长发育。为了使外源基因在植物体内有效发挥作用,同时又可减少对植物的不利影响,目前人们对特异表达启动子的研究和应用越来越重视。己发现的特异性启动子主要包括器官特异性启动子和诱导特异性启动子。例如,种子特异性启动子、果实特异性启动子、叶肉细胞特异性启动子、根特异性启动子、损伤诱导特异性启动子、化学诱导特异性启动子、光两导特异性启动子、热激诱导特异性启动子等。这些特异性启动子的克隆和应用为在植物中特异性地表达外源基因奠定了基础。在植物转基因研究中,使用天然的启动子往往不能取得令人满意的结果,尤和暂时性的调控是发育和形态的基础,种子贮藏蛋白基因在种子内严格的种子特异性和依赖发育过程的表达调控为研究植物分化基因的活性提供了一个合适的实验系统。种子贮藏蛋白的种子特异性调控首先在转录水平上,过量转录可以调整翻译产物的最终的量。目前认为特异的反式转录因子和顺式转录因子与靶侧翼区的���斡胍阎5暮怂岬鞍滓蜃咏岷希�欢�蠖嗍�⒚挥械玫胶芎玫�阐述。己从几个物种中克隆出来的贮藏蛋白基因的��嘁砬�蛄校�赡芡贫�杂�
本实验拟应用噬菌体原位杂交的方法筛选花生种子贮藏蛋白基因�����以�����狪�删�逦T靥骞菇�嘶ㄉ��蜃槭删�逦目狻6允删�逦目饨�列,���治鲋な蹈貌糠稚嫌涡蛄形狝���基因的线性上游序列。对该序列进关键词二花生,基因组噬菌体文库,��.���舳�樱�匾旄咝П泶�掺类号:��山东师范大学硕士学位论文种子贮藏蛋白保守区的研究,保守区可能参与了反式作用因子的结合从而对基因在种子内特异表达进行调控。花生种子贮藏蛋白基因����窃谥肿幽谔匾旄咝П泶锏幕�颍�撇馄淦�动子可以调控基因在种子内特异高效表达,因此对于该启动子的研究具有很大的意义。启动子序列。用��的方法提取了花生黄花苗的基因组����胁糠置盖校�行滴度检测,构建的文库符合要求。���狿�是一种扩增己知���尾嘁硇蛄械姆椒ǎ��靡阎5腁���基因的��序列设计引物,扩增出该基因在基因组中包含内含子的部分序列,根据该段序列设计嵌套引物,进行��.���玫紸���基因的部分上游序行了初步的启动子分析,发现没有启动子的保守序列,推测是长距离凋控的启动卡。;.
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