文档介绍：山东师范大学
博士学位论文
花生金属硫蛋白基因的克隆及AhMT2a基因的功能鉴定
姓名:全先庆
申请学位级别:博士
专业:植物学
指导教师:毕玉平
20070608
:/釜\笔夕己学位论文版权使用授权书独创声明或撰写过的研究成果,也不包含为获得————�ⅲ喝缑挥衅渌�枰L乇鹕�本学位论文作者完全了解堂蕉有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权—兰撞—可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成明的,本栏可空�蚱渌�逃��沟难�换蛑な槭褂霉�牟牧稀S胛乙煌�ぷ鞯耐�径��辏��譬日签字日期:���闖月牙日果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。导师签字:或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。�C艿难�宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ�签字日期:��
苷酸差异,编码�或�个氨基酸残基,由���和彳凇�暮塑账嵝蛄型�花生金属硫蛋白基因的克隆黝����虻墓δ芗����直鹩��岬�/�中文摘要隆重金属代谢相关基因并研究其功能、利用植物修复技术清除受污染的土壤和水体中的重金属是当前的研究热点之一。一般认为,金属硫蛋白����������藏、胁迫响应、发育调节和活性氧清除等方面发挥着作用。目前,已有多例成功本实验以花生为实验材料,利用���技术分离到�霰嗦雝��克隆,通过构建花生种子��文库、大规模测序克隆到�鰐��和�鰐���编码基因的��序列,我们选择其中的�鰐��理条件下基因的表达情况;构建原核表达载体转化大肠杆菌,测定了转化菌和对�编码基因的��序列相似性很高,只有几个核一样具有�鯟�富含结构域。�鰐��序列相似性也较高,编码�个氨基酸残基,���和���只有�霭被��不同,都含有�个��谢��哂�个��缓�峁褂颉�����砘ㄉ�酌���舛ú煌�Q�鞴僦兄亟鹗舻暮�浚�⑾诛佑胪�饕T诨ㄉ�母�坷刍���主要在花生叶中累积,其中根中镉的含量分别为茎和叶中的�逗�倍。根中较高的铜、镉含量与后面进行的分别用这两种金属处理后花生根中���的��含量增加相一致,表明���可能主要与花生根中铜和镉的脱毒有关。��颐茄≡胥輍��基因进行����咏环治觥S捎诨ㄉ��蜃橹泻�卸喔鰐���仃基因,所以不能排除其它���打基因成员参与杂交的可能性。未施加任何胁迫时,一胁�≈T诟�⒕ァ⒁兜扔Q�鞴僦卸加斜泶铮�诶弦吨械谋泶锪孔罡撸�幼叶中的表达量较低,在成熟根中检测不到一�扑锏谋泶铮�砻縻較��蚧�虻�重金属污染是一个重要的环境问题,研究植物的重金属耐受和脱毒机制、克��在植物对重金属的耐受和脱毒、金属离子稳态的维持、必需金属离子的贮利用转基因技术过量表达�基因提高植物重金属抗性和重金属累积量的报道。�的����个����嗦牖�因��������进行了功能分析,比较了在不同重金属和其它多种胁迫处照菌的重金属耐受性和重金属累积量;构建植物表达载体转化拟南芥,测定了转基因拟南芥种子萌发及幼苗生长对重金属的耐受情况,主要结果如下:��臼笛榈玫降�个��导出的氨基酸序列完全相同。���基因编码�个氨基酸残基,与���基因���和���的核苷酸�����表达没有明显的组织特异性。用������砘ㄉ��瓵����蛟诟����、���甿�/�山东师范大学博士学位论文���疞���/�
发挥作用,加之花生臁因种类较多,可能不同的�瑾因会在不同类型的重金害。在用不同成熟时期的花生种子构建的��文库中,�胜因的��约占总表现出高于野生型的耐受�署���哪芰Α���菇�嗽�吮泶镌靥錺������⒔�渥;�酱蟪Ω司鶥��小=ū泶���奶醮�Q∮肞�����蚦���掷胱友芯孔;��闹亟鹗裟褪�性和累积量发现,表�藺����虻淖;��砸陨先�掷胱拥哪褪苄院屠刍�慷�南芥种子萌发时表现出高于对照的耐受��和��的能力,但耐受��的程度与对��状卫�肦���际鹾蚭��目夤菇ḿ际蹩寺〉交ㄉ�鹗袅虻鞍谆�蚣易��畑����基因进行����咏唬�⑾指没�蚴躢�������、�℃热激、���和��处理的诱导,表明彳秘�孙基因可能与金属脱毒和活性氧的清除有关。��菇�嗽�吮泶镌靥搴椭参锉泶镌靥宸直鹱;�蟪Ω司�湍饽辖妫�;��硐�作用。本工作对于更好地理解植物�、更加深入地研究其功能具有一定的意义。和叶中的表达,表明���可能在花生的根和叶中对镉、铜的代谢或脱毒过程中属代谢或脱毒过程中发挥作用。用���畉����腁�或�℃处理花生幼苗����基因在叶和根中的表达量