文档介绍：细胞培养基本技术概述
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒
清洗
在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感,均能影响培养细胞的生长
微生物产品附带杂物
上次细胞残留物
非营养成分的化学物质
需要清洗的培养用品
玻璃器皿的清洗
胶塞的清洗
塑料制品的清洗
玻璃器皿的清洗
包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤
清洗后的玻璃器皿
干净透明无油迹
不能残留任何物质
浸泡:初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附着物软化或被溶掉
新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等
先用自来水简单刷洗,然后用5%稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质
再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质,干固后不易洗掉
用后立即浸入水中,要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面上
刷洗:
用毛刷沾洗涤剂刷洗,以除去器皿表面附着较牢的杂质
刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度
浸酸:玻璃器皿浸泡到清洁液中
清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质
浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面
浸泡时间:一般为过夜,不应少于6 小时
清洁液常用三种:重铬酸钾(g)浓硫酸(ml)蒸馏水(ml)
强清洁液 63∶1000∶200
次强清洗液 120∶ 200∶1000
弱清洁液 100∶ 100∶1000
配制时应注意安全,须穿戴耐酸手套和围裙,并要保护好面部及身体裸露部分
配制过程中可使重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥发,配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色
冲洗
在使用后,刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或清洁液的残迹
最好用洗涤装置
如用手工操作
需流水冲洗十次以上,每次水须灌满及倒干净,最好用蒸馏水清洗3-5 次,晾干备用
胶塞的清洗
新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质,应先用自来水冲洗,再做常规处理
常规清洗方法
每次用后立即置入水中浸泡,用2% NaOH 或洗衣粉煮沸10-20 分钟(以除掉培养中的蛋白质),自来水冲洗,蒸馏水冲洗2-3次,晾干备用
塑料制品的清洗
塑料制品现多是采用无毒并已经特殊处理的包装,打开包装即可用,多为一次性物品
必要时用2% NaOH 浸泡过夜,用自来水充分冲洗,再用5%盐酸溶液浸泡30 分钟,最后用自来水和蒸馏水冲洗干净,晾干备用