文档介绍：生活饮用水卫生标准GB5749-2006
生活饮用水标准检验方法GB5750-2006
微生物指标及微生物检验的介绍
广东省CDC微生物检验所严纪文
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB5749-85,标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用水标准相比,主要差别在于微生物指标项目少,缺少有机物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠菌群2项,不能确切的评价水质的卫生状况。
修订后的标准,微生物学指标增加为6项:菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和隐孢子虫。
同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆菌。
水质常规指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
细菌总数
100 CFU/mL
菌落总数/(CFU/mL)
100
总大肠菌群
每100mL水样中不得检出
总大肠菌/(MPN/100mL或CFU/100mL)
不得检出
粪大肠菌群
每100mL水样中不得检出
耐热大肠菌/(MPN/100mL或CFU/100mL)
不得检出
游离余***
,
大肠埃希氏菌/(MPN/100mL或CFU/100mL)
不得检出
水质非常规指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
菌落总数/(CFU/100mL)
500
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
贾第鞭毛虫/(个/10L)
<1
-
隐孢子虫/(个/10L)
<1
生活饮用水水质参考指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
肠球菌/(CFU/100mL)
0
-
产气荚膜梭状芽胞杆/(CFU/100mL)
0
一、菌落总数
修订前
修订后
细菌总数
原理:细菌总数是指水样在一定条件下培养后(培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等)所得1ml水样所含菌落的总数。按本规范规定所得结果只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数
培养条件:36±1℃ 24h
菌落总数
定义:水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后,所得1ml水样所含菌落的总数。
36±1℃ 48h
二、总大肠菌群(埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属)
除多管发酵法、滤膜法外,增加了酶底物检测方法
多管发酵法
修订前
修订后
多管发酵法原理:总大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便,具有指示菌的一般特征,故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。
总大肠菌群定义:总大肠菌群指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
结果:5个10ml 管中阳性管数为0时,MPN值为0(主要针对出厂自来水或需每天检验一次的水样)
结果:5个10ml 管中阳性管数为0时,MPN值<
滤膜法
修订前
修订后
滤膜法原理:,细菌被截留在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上,经培养后,计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。
培养条件:37℃ 18-24h
滤膜法定义:, 将滤膜贴在添加乳糖的选择培养上, 37℃培养24h,能形成特征菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。
培养条件:37℃ 24±2h
酶底物法
酶底物法定义:总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组,该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化,以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。
培养基:MMO-MUG培养基(Minimal Medium ONPG-MUG)。
本方法可分为定性和定量。
定量法:10管法、51孔定量法
培养条件: 36±1℃ 24h
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色
酶底物法的主要特点:
优点:
可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌
检测时间较短,只需18-24h,最长需要28h
无需确证试验
操作简单,对试验条件和人员要求低
缺点:
检测成本高
总大肠菌群三种方法的比较
多管发酵法
滤膜法
酶底物法
时间
24-72h
24-48h
24-28h
验证试验
需要
需要
不需要
步骤
较繁
较简便
简便
特殊设备
显微镜
显微镜、过滤设备
压膜机
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