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生物化学实验指导
重庆邮电学院生物信息学院
前言
生物化学是一门比较年轻的实验科学, 近年来发展相当迅速,其任何进展都是以实验为基础的。生化实验手段不仅推动了本学科的进展,而且被兄弟学科利用,促进了各学科的共同发展。生化实验技术的学习已经成为理解近代生命科学的重要基础之一。为了提高生化教学质量,使同学们了解必要的生化实验技术,进行一定的基本技能、基本操作训练,培养同学们独立操作、分析问题和解决问题的能力,我们借鉴兄弟院校的经验编写了这本《生物化学实验指导》,供我院开设的各专业选用。
由于我们主客观条件所限,而且编写时间仓促,肯定会有不少缺点和错误,请提出批评意见,帮助我们不断改进教学。
编者李茂言
2002年6月
目录
前言 2
实验一生化实验基本操作 5
附:无蛋白质血滤液的制备 9
实验二缓冲溶液 10
实验三功能基实验 13
实验四糖的性质实验 17
实验五蛋白质的性质实验 19
实验六蛋白质含量的测定(凯氏定氮法) 22
实验七氨基酸的纸层析 24
实验八凝胶层析法分离血红蛋白与糜蛋白酶 28
实验九血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 31
实验十肝组织核酸的分离与鉴定 33
实验十一核酸的定量分析 36
实验十二温度、pH等对酶促反应速度的影响 39
实验十三碱性砱酸酶Km数值的测定 42
实验十四丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 44
实验十五胡萝卜素的柱层析分离法 46
实验十六比色分析法及7220型分光光度计的原理和使用 48
附:应用比色分析法绘制测定无机磷的标准曲线 54
实验十七维生素C的提取与定量 55
实验十八血中葡萄糖含量的测定 57
实验十九糖酵解 60
实验二十肝糖原的提取与鉴定 62
实验二十一血清总胆固醇的测定 64
实验二十二肝的生酮作用 66
实验二十三薄膜层析法分离血清脂类 68
实验二十四血清甘油三酯的测定 70
实验二十五氨基移换作用 72
实验二十六血清谷丙转氨酶的测定 74
实验二十七血浆二氧化碳结合力的测定 77
实验二十八维生素C的定量测定 79
实验三十粘多糖—肝素钠效价的测定 85
实验三十一细胞色素C的制备和测定 88
实验三十二枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定 92
实验三十三酯酶的分离、纯化与活性测定 96
实验三十四蛋白质浓度测定――紫外线(UV)吸收法 101
实验三十五核酸浓度测定――紫外线(UV)吸收法 105
实验三十六酵母RNA提取与地衣酚显色测定法 108
实验三十七二苯胺法测定DNA 111
实验三十八植物DNA的提取 113
实验三十九鼠肝DNA的制备 115