文档介绍：实验六
直接滴定法测定食品中的还原糖GB/T -2008
课时
4
教学目标
岗位能力(技能)目标
1、了解测定还原糖的意义;
2、掌握直接滴定法测定还原糖的基本原理与操作方法;
3、掌握直接滴定法测定还原糖的条件及注意事项;
教学活动设计
还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或***基的单糖和含有游离的半缩醛羟基的双糖都具有还原性。葡萄糖分子中含有游离醛基;果糖分子中含有一个游离***基;乳糖和麦芽糖分子中含有半缩醛羟基,故它们都是还原糖。其他双糖(如蔗糖)、三糖乃至多糖(如糊精、淀粉等),其本身不具还原性,属于非还原性糖,但都可以通过水解而生成相应的还原性单糖,测定水解液的还原糖含量就可以求得样品中相直接滴定法比应糖类的含量。因此,还原糖的测定是糖类定量的基础。
还原糖的测定方法很多,其中最常用的有直接滴定法及高锰酸钾滴定法。
一、实验原理
试样经除去蛋白质后,在加热条件下,以次***蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
将—定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。酒石酸钾钠铜具有氧化性,在加热条件下,能将还原糖氧化成醛酸,本身还原为氧化亚铜沉淀。以次***蓝为指示剂,用除蛋白质后的样品溶液进行滴定,样品溶液中的还原糖将二价铜全部还原后,稍过量的还原糖则可把次***蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。
二、仪器和试剂
1、仪器
酸式滴定管(25 mL) /zTeoE8H;可调电炉(带石棉网)
2、试剂
实验用水为蒸馏水, 试剂不加说明者, 均为分析纯试剂。
(1)碱性酒石酸铜甲液:称取5g硫酸铜(CuSO4•5H2O)及0. 05g次***蓝。溶于水中并稀释至 1000mL。
(2)碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁***化钾,完全溶解后,用水稀释至l000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
(3)乙酸锌溶液:称取21. 9g乙酸锌[Zn(CH3COO)2 • 2H2O],加3mL冰醋酸,加水溶解并稀释至 l00mL。
(4)106g/L亚铁***化钾溶液:称取10. 6g亚铁***化钾,溶于水中,稀释至l00mL。
(5)盐酸(分析纯)。
(6)葡萄糖标准溶液:准确称取lg()经98~100°C干燥2h的葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸(防止微生物生长),转移入l000mL容量瓶中,并用水稀释至l000mL。。。
3、材料
每日C鲜橙汁;咖啡
三、操作步骤
(1) 样品处理:
①饮料:摇匀,,加水50mL,摇勻后慢慢加入5mL醋酸锌及5mL亚铁***化钾溶液,并加水至刻度,混勻,静置30min。用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
②咖啡:~5g试样,溶解,转移至250mL容量瓶中,以下按①自“慢慢加入5mL醋酸锌……”起依法操作。
(2) 碱性酒石酸铜溶液的标定:,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从