文档介绍：RPHPLC法测定穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量论文
【摘要】目的建立穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Hypersil ODS C18 ( mm×250 mm,5 μm),流动相:乙***%磷酸水溶液(体积比25∶75),检测波长226 nm, mL/min。~ μg(r=)范围内线性关系良好,%,%。结论本方法简便、准确、.)Nees的有效成分之一,具有抗菌、消炎、止咳平喘、清热解毒、凉血消肿等作用,广泛用于上呼吸道、消化道的细菌感染所引起的各种疾病[1]。关于穿心莲药材及其制剂中穿心莲内酯的含量分析测定方法已有比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法等报道[2-5]。本文采用反相高效液相色谱法(RPHPLC)测定了穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量,方法简便、快速、准确,可作为穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。
1 仪器与试剂

美国安捷伦科技有限公司生产HP1100高效液相色谱仪,G1311A四元泵,G1314A紫外检测器,HP1100/Agilent化学工作站,Lambda25型紫外分光光度计(带扫描功能),德国赛多利斯BP211D型电子天平( mg),SB2200超声波清洗器,针筒式样品过滤器,溶剂过滤器。

甲醇(分析纯, μm滤膜滤过);乙***(色谱纯);水(重蒸水);穿心莲提取物:桂林莱茵生物制品有限公司提供;穿心莲内酯对照品:中国药品生物制品检定所提供,批号:0797—200106。
2 方法与结果
检测波长的选择

对穿心莲对照品溶液进行最大吸收的波长扫描,记录色谱图(图1),穿心莲内酯的最大吸收波长在226 nm处,故选择此波长为穿心莲内酯的检测波长。
图1 穿心莲内酯吸收光谱图(略)
UV spectrogram of andrographolide
色谱条件

色谱柱为Hypersil ODS C18( mm×250 mm,5 μm),柱温为室温,流动相为乙***%磷酸水溶液(体积比25∶75), mL/min,进样量5
μL,检测波长226 nm。
标准曲线的制定

精密称取穿心莲内酯对照品10 mg置10 mL容量瓶中,加甲醇超声溶解后定容至刻度, mg/mL的对照品溶液, μm滤膜。、、、、、、 mL分别置10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。按上述色谱条件进行分析,每次进样5 μL,以对照品穿心莲内酯进样量为横坐标(m),以与其相应的峰面积为纵坐标(A),绘制标准曲线,得线性回归方程:A=3 44m- 008, r= 5。~ μg范围内线性关系良好。对照品HPLC图谱见图2。
供试品溶液的制备

精密称取穿心莲提取物(批号:2002006)粉末10 mg置10 mL容量瓶中,加甲醇超声溶解15 min,取出冷却至室