文档介绍：兰州理工大学
硕士学位论文
大肠杆菌O157:H7快速检测技术研究
姓名:侯楠楠
申请学位级别:硕士
专业:微生物与生化药学
指导教师:杨爱梅;李君文
20100505
摘要大肠杆菌:是肠出血性大肠杆菌最具代表性的血清型,其感染剂量低、致病力强,在世界各地多次暴发流行,已成为公共卫生领域的重大问题。建立和完善其检测技术是及时发现传染源、控制其传播的关键环节之一。本研究拟建立一种无需增菌即能快速灵敏检测大肠杆菌:的新技术。本研究依托于两种功能化纳米颗粒。先制备了一种四氧化三铁为核心、葡聚纳米免疫磁颗粒。功能化胶体金为一种表面标记有一定比例的大肠杆菌:多克隆抗体和生物素化核酸探针的胶体金颗粒,为进一步完善检测效果对两者的本检测体系应用纳米免疫磁颗粒对样品中的大肠杆菌:进行特异性地富集分离,再依次与功能化胶体金、昙堑牧疵骨缀退卦咏唬詈缶璗显色在Σ舛ㄎ舛戎怠C庖叽欧掷牍探谑×嗽鼍奔洌词寡分仅存有微量目标菌痬也能有效分离;。为优化检测体系,对各环节反应条件均进行了摸索,并绘制了标准盐线,检测下限可达到/,整个检测体系可在内完成。对食品模拟样品和实际样品进行了初步的应用测试,并与常规检测方法进行对具有检测时间短、灵敏度高、操作简便等优点,在环境、食品检测,临床诊断和流行病监测中具有广泛的应用前景。关键词:大肠杆菌:;快速检测;纳米免疫磁颗粒;功能化胶体金;糖为外壳的磁性纳米颗粒,经氧化后包被大肠杆菌:单克隆抗体,制成最适标记量进行了摸索。经沙门氏、志贺氏等共株菌验证本检测体系特异性,证明特异性良好。比,证明了其准确性和灵敏性。‘本研究建立了一种基于功能化纳米粒子的大肠杆菌:快速检测技术,硕士学位论文
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强穆谈韵哟日期:二咖年铝θ兰州理工大学学位论文原创性声明和使用授权说明日期:刀乃年/月原创性声明学位论文版权使用授权书本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的‘本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任法律后果由本人承担。作者签名:论文被查阅和借阅。本人授权兰州理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段务。导师签名:
第滦髀大肠杆菌:的概况.⑸⊙匦大肠埃希氏菌虺拼蟪Ω司籈魑U>憾存在于人和动物肠道中,并广泛存在于自然界,通常对人体无害。但大肠埃希氏菌的某些菌株对人有致病性,根据致病机制,致病性大肠菌分为隼嘈停撼Φ致病性大肠菌,Φ狼窒源蟪頲珽,产肠毒素大肠菌晟,性肠炎、溶血性尿毒症综合症的一类大肠杆菌,:是其中的一个主要菌型,低温,在牛肉糜内于.℃冰箱内能存活鲈拢谧匀凰肪持锌纱婊钍苤:除不发酵或迟缓发酵山梨醇外,其他常见生化特征与大肠埃希氏菌基本相似。葡萄糖产酸产气,靛基质、甲基红阳性,试验与柠檬酸盐阴性,氧化酶、硝酸盐还原、硫化氢、苯丙氨酸脱氨酶阴性嫠拗鳎悍篡欢锸谴蟪Ω司篐闹饕V嫠拗鳎渲幸耘W具代表性,是人感染大肠杆菌:最重要的贮存宿主;其他家养和野生动物颉⒅怼⒙怼⒐贰⒙埂⒓Α⒛窭也是潜在的传染源,均可成为致病菌的携带者。在这些动物中,大肠杆菌:通常只引起无症状的肠道感染,并不úネ揪叮悍治V苯哟úズ图浣哟úァR环矫妫敫腥净颊呋蛭拗⒆葱带者及受感染动物的直接接触可导致感染;另一方面,通过食源性或水源性的污染导致的间接传播。其中食源性传播是大肠杆菌:感染的主要传播途径,在食源性大肠杆菌:感染中,未加工或未充分加热的肉类制品成为传播肠道出血性大肠菌,侵改芤鸪鲅>蹇乖嘈停琀为鞭毛抗原类型【。大肠杆菌:属于肠杆菌科埃希氏菌属,革兰氏染色阴性,无芽孢,有鞭毛,动力试验阳性;鞭毛抗原可丢失,动力试验阴性。最适生长温度为妫℃繁殖迅速,其生长周期为℃,:℃,;.℃生长不良,.停止生长。具有较强的耐酸性,.甇,℃可耐受∈倍皇媪Γ荒数月;不耐热,℃下即死亡;对氯敏感,即迅速死亡。发病。硕士学位论文,
大肠杆菌:,其中牛肉是最主要的传播载体;受污染的新鲜水果、蔬菜及未经巴斯德消毒的奶制品也可令人感染。腥炯亮浚捍蟪Ω司篐腥炯亮考ǖ停淮紊闳龌罹涂致病,而一般大肠杆菌致病需鲆陨稀F涓腥厩狈