文档介绍：过柱子的经验总结
药物化学 2010-11-18 18:01:33 阅读0 评论0   字号:大中小 订阅
过柱子经验总结 
 御药苑-水之渠
1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.
 
2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,(是指在所需组分 Rf 在 --,杂质相差 以上) , 就可以少用硅胶.
 
3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC :石油醚系统;极性较大的用甲醇:***仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇: Rf 值在 - :石油醚<环己烷/己烷<苯***<***仿<乙酸乙酯<正丁醇<***<乙醇<甲醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC (60-90).
 
4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,/***体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是***仿/醇体系,就用***仿拌.
 
5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(***仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(***仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次.
 
6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床约被压缩至 9/10 ,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.
 
7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散),加入一些洗脱剂,,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm 就够了) ,再加压,这样避免了溶剂(如二***甲烷等)夹带样品快速下行.
 
8, 过柱和收集:,:10mg 上样量,1g 硅胶 H, 收集馏分;1-2g 上样量,50g 硅胶(200-300 目) ,20-50ml ,会被淋洗剂带到产品中的.
 
9, 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开.
 
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