文档介绍：目录
实验一芦丁的提取精制与鉴定
实验二精制芦丁的含量测定
实验三发酵法生产丝氨酸
实验四青霉素抑菌圈的观察及青霉素效价的测定
实验五崩解时限检查
时间安排:
16周星期四上午:丝氨酸产生菌培养基、金黄色葡萄球菌所需培养基配制、灭菌等
16周星期五下午:丝氨酸产生菌第一代接种
17周星期一下午:丝氨酸产生菌第二代接种,金黄色葡萄球菌第一代接种
17周星期三上午:丝氨酸产生菌离心,崩解时限检查
17周星期三下午:建立丝氨酸产生菌静息培养系统,金黄色葡萄球菌第二代接种
17周星期四整天:芦丁提取,金黄色葡萄球菌离心及青霉素抑菌圈观察青霉素效价测定(混合倒板、管碟法)
17周星期五上午:绘制芦丁标准曲线,及自己提取芦丁含量测定
17周星期五下午:丝氨酸显色反应
实验一芦丁的提取精制与鉴定
芦丁(Rutin)亦称芸香苷(Rutinoside),在植物界广泛存在,其中以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多,可作为提取芦丁的原料。
槐花米系豆科植物Sophora japonica 的未开放花蕾,具有调节毛细血管渗透性之作用,临床用作毛细血管止血药,如复方芦丁,也作为高血压的辅助治疗药物。除此之外,还可作为制药原料,用于制造槲皮素(Quercetin)、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、β-乙基吗啡芦丁、6-而乙基氨基芦丁等。
槐花米中芦丁的含量高达12%~16%,另含少量皂苷。芦丁水解后得到槲皮素,皂苷水解后可得到白桦酯醇(Betulin)及槐花二醇(Sophoradiol)。
芦丁为淡黄色细小针状结晶,含三个结晶水,熔点177~178℃。;芦丁溶于热水(1:200),难容于冷水(1:8000);溶于热甲醇(1:7),冷甲醇(1:100);热乙醇(1:30),冷乙醇(1:300),难溶于乙酸乙酯、丙酮,不溶于苯、三氯甲烷、乙醚及石油醚等溶剂。易溶于碱液中呈黄色,酸化后又析出。
其结构如下图:
一、实验目的
1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁的结构检识,了解苷类结构研究的一般程序和方法
二、实验原理
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶,含有三分子的结晶水。溶解度:冷水1:10000;热水1:200;冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚,溶于碱而呈黄色。
芦丁为黄酮苷,分子中具有酚羟基,显酸性,可溶于稀碱液中,在酸液中沉淀析出,可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶于热水、热乙醇,较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
三、实验器材
研钵,500mL烧杯,广泛试纸,四层纱布,滤纸,漏斗,10mL试管,5mL移液管,波棒,洗耳球,温控烘箱
石灰乳,浓盐酸,镁粉,10%α-萘酚乙醇溶液,浓硫酸,乙醇,2%二氯氧锆甲醇溶液,2%柠檬酸甲醇溶液
四、实验流程
槐米粗粉(10g)
置250ml烧杯中,加入一定饱和石灰水,加热,并维持pH8~9
煮沸20分钟,趁热滤过
滤液药渣
用一定量饱和石灰水煮沸10分钟,维持pH8~9
趁热滤过
滤液药渣(×)
合并
在60℃~70℃下用浓HCl调pH至4~5
静置,抽滤
沉淀
低温(60℃)干燥,称重。按1:20