文档介绍：目录
实验一芦丁的提取精制与鉴定
实验二精制芦丁的含量测定
实验三发酵法生产丝氨酸
实验四青霉素抑菌圈的观察
时间安排：
星期一下午：配置丝氨酸产生菌培养基及接种、金黄色葡萄球菌所需培养基及倒板
星期二上午：青霉素涂布（如周一下午时间充裕可改到周一下午）
星期三上午：丝氨酸产生菌离心，兼做抑菌圈观察
星期三下午：建立丝氨酸产生菌静息培养系统
星期四整天：芦丁提取
星期五上午：绘制芦丁标准曲线，及自己提取芦丁含量测定
星期五下午：丝氨酸显色反应
实验一芦丁的提取精制与鉴定
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutinoside），在植物界广泛存在，其中以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多，可作为提取芦丁的原料。
槐花米系豆科植物Sophora japonica 的未开放花蕾，具有调节毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药，如复方芦丁，也作为高血压的辅助治疗药物。除此之外，还可作为制药原料，用于制造槲皮素（Quercetin）、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、β-乙基吗啡芦丁、6-而乙基氨基芦丁等。
槐花米中芦丁的含量高达12%~16%,另含少量皂苷。芦丁水解后得到槲皮素，皂苷水解后可得到白桦酯醇（Betulin）及槐花二醇（Sophoradiol）。
芦丁为淡黄色细小针状结晶，含三个结晶水，熔点177~178℃。；芦丁溶于热水（1:200），难容于冷水（1:8000）；溶于热甲醇（1:7），冷甲醇（1:100）；热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、三氯甲烷、乙醚及石油醚等溶剂。易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出。
其结构如下图：
一、实验目的
1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法
二、实验原理
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水。溶解度：冷水1:10000；热水1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶于热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
三、实验器材
研钵，500mL烧杯，广泛试纸，四层纱布，滤纸，漏斗，10mL试管，5mL移液管，波棒，洗耳球，温控烘箱
石灰乳，浓盐酸，镁粉，10%α-萘酚乙醇溶液，浓硫酸，乙醇，2%二氯氧锆甲醇溶液，2%柠檬酸甲醇溶液
四、实验流程
槐米粗粉（10g）
置250ml烧杯中，加入一定饱和石灰水，加热，并维持pH8～9
煮沸20分钟，趁热滤过
滤液药渣
用一定量饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8～9
趁热滤过
滤液药渣（×）
合并
在60℃～70℃下用浓HCl调pH至4～5
静置，抽滤
沉淀
低温（60℃）干燥，称重。按1：200的比例加水，
加热使溶解，趁热滤过
滤液
静置，抽滤，减压干燥，计算收率
芦丁精制品
五、实验内容
1、芦丁的提取精制
称取槐花米10g，置于干燥的研钵中用研钵挤压成粗粉。-1g的石灰粉。置于干净的小研钵中，加入5mL水后研成乳液备用。
将槐花米粗粉置于250mL烧杯，加蒸馏水100-150mL，煮沸，在搅拌下加入石灰乳至pH8-9，在此条件下微沸20-30min，过滤。在60-70℃下，用浓盐酸调滤液至pH4-5，搅匀，静置1-2h，过滤。沉淀用蒸馏水洗2-3次至中性，抽干，60℃干燥得芦丁粗品。
称定芦丁粗品重量，按1:200的比例悬浮与蒸馏水中，煮沸10-15min，趁热过滤，冷却滤液，充分静置结晶。抽滤，60-70℃干燥得精制芦丁。称重，计算得率。
2、芦丁的鉴定
取芦丁适量，加乙醇使溶解，分成三份供下述试验用：
(1)盐酸镁粉试验：取样品液适量，加2滴浓HCl、再酌加少许镁粉，即产生剧烈的反应，并逐渐出现红色至深红色。
(2)锆-枸试验：取样品液适量，然后加 2％ZrOCl2的甲醇溶液，注意观察