文档介绍：Finding Whoa at Office
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色谱定性和定量分析
第八章
滨州医学院药学院
赵峰
色谱的定性分析
色谱法
混合物
样品的来源性质和分析目的
一般定性
波谱法
单体
利用已知标准物对照定性
依据:相同的色谱操作条件,组分有固定的色谱保留值
保留时间
有了解, 组成比较简单, 有标准物质作对照
2、利用保留体积对照定性
避免载气流速变化的影响
V是利用载气流速和保留时间来计算
利用T和V与标准物质的比较
可靠性与分离度有关
样品中组分多,色谱峰密集,直接比较困难
同一保留时间对应多种化合物
3、利用加入法
将已知物质加入到样品,观察各组分色谱峰的相对变化来进行定性
适用于样品中组分色谱峰过密
操作方法:
做出样品的色谱图
加入某纯已知物
在同样的色谱条件下做混合物的色谱图
峰高增加即可能为加入的已知物
另一种情况:增加了一个色谱峰
2. 利用文献保留值定性
相对保留值定性
组分和基准物质的调整保留值的比值
仅与固定液和柱温
适用于:组成简单、已知范围的混合物
选定一定基准物按文献报道的色谱条件进行实验,计算两组分的相对保留值
选择易得到纯品,与分析组分保留至相近的作基准物质
不受柱长、固定相填充情况、固定液用量、载气的流速影响
保留指数retention index
利用已知物得文献保留值与未知物得测定保留值对照
保留指数
与柱温和固定相性质有关
计算:Kovats指数
正构烷烃的保留指数为碳原子数乘以100
试验方法:
测出组分保留时间
选择3种正构烷烃,分别大于小于样品
以正构烷烃的调整保留值的对数值对保留指数I作图
由被测组分的调整保留值的对数从图上求得保留指数
保留指数的精密度及误差来源
1、系统误差:
气流速控不稳,如钢瓶出口压力低
气路有污染
温度控制不十分准确
2、测量误差
死时间、保留时间、保留距离的测量
3、采用双柱或多柱
4、用保留指数进行定性需要知道被测样品的化合物类型,从文献查找该类物质的色谱条件
温度对保留指数的影响
不同温度下的保留指数
1、同一物质、同一色谱柱上的保留指数在一定温度范围内与柱温呈线性关系
非极性固定相线性范围比极性固定相大,
2、保留指数的温度效应
保留指数的温度变化率(I/t)对于不同类物质是不同的,如
芳烃>环烷烃>三取代烃>二取代烃和一取代烃
4、计算机检索
计算机储存的标准保留指数换算为用户色谱条件下的保留指数和保留时间
5、保留指数的优点
以正构烷烃,把某组分的保留行为与紧靠它的正构烷烃来标定,计算更为准确
具有形象化优点
与文献值对照可定性鉴定,与固定相的性质和柱温有关,准确度和重现性好
想关性好,利于判断结构
保留指数是对数值,一组同系物的I值与化合物的沸点和碳数呈线性关系