文档介绍：选修三
现代生物科技专题
一、基因工程的原理及技术
基因工程的别名
基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
生物体外
操作对象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本过程
剪切→拼接→导入→表达
结果
人类需要的基因产物
1、原理:
专题一基因工程
2、技术:
(1)基本工具
限制性核酸内切酶-“分子手术刀”
分布:主要在原核生物中
特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点
结果:产生黏性未端或平末端
举例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开
“分子手术刀”——限制性核酸内切酶
双链DNA结构和磷酸二酯键位置
切割DNA分子时产生的两种不同末端
连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。
(恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键)
分子缝合针——DNA连接酶
DNA连接酶的分类
根据酶的来源分:
DNA连接酶:只能“缝合”DN***段互补的黏性末端
:能“缝合”DN***段互补的黏性末端和平末端
DNA分子的切割和连接
作用:将外源基因送入受体细胞
条件:
(1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存
(2)具有一个或多个限制酶切点
(3)具有某些标记基因
(4)载体必须安全,不会对受体细胞有害
种类:质粒、噬菌体和动植物病毒
基因的运输工具——运载体

常用载体-质粒的特点