文档介绍：上海汉尼生物技术有限公司
李燕燕产品经理
灭菌方法与生物指示剂
概要
灭菌法和生物指示剂
生物指示剂的形式
无菌保证水平
灭菌工艺验证
常用灭菌方法
制药工业常用的灭菌方法
生物指示剂的使用
孢子数测定
灭菌法和生物指示剂
灭菌法
系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去,从而使物品残存活微生物的概率下降至预期的无菌保证水平的方法。
生物指示剂
系一类特殊的活微生物制品,可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。
生物指示剂的形式
一定数量的孢子附着在惰性载体上,
如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等
孢子悬浮液密封于安瓿中
无菌保证水平
无菌保证水平
一批物品的无菌特性只能相对地通过物品中活微生物的概率低至某个可接受水平来表述,即SAL(sterility assurance level)。
我国及欧美药典都把SAL不得大于百万分之一作为最终灭菌产品无菌保证的要求,即SAL≤10-6
灭菌工艺验证
验证一个灭菌工艺系统能否使产品灭菌后达到无菌要求, 通常认为灭菌后微生物残存概率小于1×10-6。
物理性验证:通过得到的热分布与热穿透数据, 来估测一个灭菌程序对微生物的致死性。
化学指示剂验证:物品包外用化学指示剂用于验证物品是否经过灭菌处理,物品包内中心部位的化学指示剂才可作为物品是否达到灭菌的参考标志。
生物指示剂验证:将已知其耐热性的生物指示剂直接接种在产品溶液或相似溶液中进行验证, 是评判灭菌工艺杀灭效果最直观有效的方法, 也是灭菌工艺验证必不可少的试验。
常用的灭菌方法
湿热灭菌法
干热灭菌法
气体灭菌法
辐射灭菌法
过滤除菌法
不同灭菌方式不同的菌种种类的选择
灭菌方法
生物指示剂
保藏号
D值
备注
湿热灭菌法
嗜热脂肪芽孢杆菌
Bacillus stearothermophilus
NCTC 10007
NCIMB 8157
7953
-
生孢梭菌孢子
Clostridium sporogenes
NCTC 8594
NCIMB 8053
7955
-
干热灭菌法
枯草芽孢杆菌
Bacillus subtilis
NCIMB 8058
9372
>
去热原验证时加大肠杆菌内***(Escherichia coli endoxin)
辐射灭菌法
短小芽孢杆菌
Bacillus pumilus
NCTC 10327
NCIMB 10692
27142
3kGy
短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程,但不能用于灭菌辐射剂量的建立
气体灭菌法
枯草芽孢杆菌
Bacillus subtilis
NCTC 10073
9372
>
环氧乙烷灭菌
嗜热脂肪芽孢杆菌
Bacillus stearothermophilus
NCTC 10007
NCIMB 8157
7953 12980
气态过氧化氢灭菌
过滤除菌法
缺陷假单胞菌
Pseudomonas diminuta
19146
黏质沙雷菌
Serratin  marcescens
14756
湿热灭菌法
指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。
须保证物品灭菌后的SAL≤10-6
对热稳定的物品,可采用过度杀灭法,
其SAL应≤10-12
适用范围
药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品