文档介绍：HPLC测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量
摘要:目的建立测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量的高效液相色谱方法。方法采用Waters Symmetry Shield-C18色谱柱(250 mm× mm,5 μm),以甲醇-水(30∶70)为流动相, mL/min,检测波长230 nm,柱温为室温。~ μg范围内线性关系良好,r= 9,%,RSD=%。结论该方法操作简便,快速易行,重复性好,结果准确可靠,可用于测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量,以控制该制剂的质量。
关键词:复方赤芍颗粒;芍药苷;高效液相色谱法
中图分类号: 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2014)04-0078-03
复方赤芍颗粒是由赤芍、三七等10余味中药组成的复方制剂,具有活血化瘀、止痛祛瘀功效。该方来源于甘肃省老中医经验方,为方便临床应用,将其研制成颗粒剂使用。赤芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora ,性微寒、味苦,具有清热凉血、散瘀止痛之功效[1],芍药苷是其中含量最高的活性成分[2]。目前赤芍中芍药苷的测定方法较多[3-6],笔者建立高效液相色谱法(HPLC)测定该制剂中芍药苷含量的方法。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(美国Waters公司1525型),717自动进样器,2487双通道紫外检测器,Empower数据处理系统。METTLER AE240型万分之一电子分析天平(德国Sartorius赛多利斯),十万分之一分析天平。HS6150型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
芍药苷对照品(批号110736-200629,中国食品药品检定研究院);甲醇(山东禹王集团化工分公司,色谱纯);甲醇(天津市博迪化工有限公司,分析纯),水为自制超纯水;复方赤芍颗粒及阴性样品为自制。
2 方法与结果
色谱条件
色谱柱:Waters Symmetry Shield-C18( mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(30∶70);流速: mL/min;检测波长:230 nm;柱温:室温;进样量:20 μL。在该色谱条件下,样品中被测成分能够达到基线分离,。理论塔板数均高于3000。色谱图见图1。
对照品溶液的制备
mg,置5 mL量瓶中,用甲醇配制成每1 mg的储备液,备用。
样品溶液的制备
g,置25 mL量瓶中,加甲醇至刻度,称定质量,超声处理(300 W,25 kHz)30 min,放冷,称定,补足减失的质量, μm微孔滤膜过滤,备用。
阴性对照溶液的制备
取缺赤芍样品的阴性样品, g,按供试品溶液制备方法制备,备用。
线性关系考察
精密吸取已配制好的对照品溶液适量,加甲醇制成每1 、、、133、266 mg的溶液,进样20 μL,每浓度进样3次,按“”项下色谱条件测定,以峰面积为纵坐标,芍药苷含量为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为A=