文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
自体内皮祖细胞移植及与卫星细胞梗死心肌联合移植的实验研
究
姓名:孙龙
申请学位级别:博士
专业:心血管外科学
指导教师:朱洪生
20040401
———±坐燕懋竺榆选!!!#兰苎璺苎篓煮主要茭文缝霉袭内皮褪缨腿鹭嚣鼹至萋蘩藏皿管内皮生长因子碱燃表皮生长燃予辣撤过氧化物酶鋈警薤溥马搬清经癀整逮嚣获秘簇蕊形术冠状动脉内支辩植入术治疗性血管生臌盘瓣形残翡黉鲞牛嫩瀵自蛋白胰酶豢撵生长簸予一血管生成霉￡甐娃强
塞俸爽嶷褪绺瓤缎移攮及与里基缨庭梗死心飘联合移稚麓实验研究第一部分臂骼飘噩星鳃艇分离、培养及鉴定啦文攮婴主甍的病髓基础,故此通过细胞移植减轻魈痕组织形成,促进苄律我们戳大鬣为研究对象,体辩分离墙弊骨髂魏卫羼细貔糟斑皮襁缅筲鼹鼹翌爨囊嚣帮蠡皮蘧缀蕤,舔凳惫缝;杖僚嘉扬榱:翔啦桶景藤鹰霜予缨腿游疗心虢疾瘾提供爨麓蹇是翡璎适羲据。全文共分谳帮分:瞽瓣:建立一稀稳定豹钵外分离,培养及鉴定自体骨骼舰卫凝绷腿的穷浚:取天蔑瑟黢麟滤,藤稳漕缳甄霰运赛鳎魏,采髑装溪黻壁方全世嚣每年都有数戳千万计的患者被诊断为充盘褴心力衰鲻,蕊中大涔数是由于心肌缺血和梗死造成,尤其是在发达国家。隽了漶疗臻盎注心脏病黎溆芝尊久感牧λソ撸齑慑髁硕囵梅椒ǎ菸物治疗、蕊静心脏糁植、机械辕戳蕻至全人工心脏和羧状动歉攒麟术等。毽对予太蒸袈、嚣浸馥嚣蘧心浚崽卷,良上方法蘩穰难遵转囊壤戆浚援。爨然心魅移植是治疗终末期心袭的理想手段,但由予供钵有限,只巍锻少数藿麓患者有此祝会。毽炎心塞遂撩秘盘供不是是晚期跤盎链·心麓瘸蕊最黢,建立岽笫蠹彼笮碾焦N耗K樱诰缢碛蚰谌醪炕珏白⒈巛滦献⑸卫星细胞嗣内皮租绷溉对心肌辩生效果以及怨K佬募〉谋;乍矧,为临认为是~糟稷袁希望靛心衰治疗警段。方法。上尊太季孽士蠢蠢静文聂∷
第糠秩馄枚薷冁趺概搿⑴嘣峒凹然三部分大鼠随发擞缎胞体辨内杰皮细燃诱导分忧时裘懿菠德特援熬鹾究法缝辱乏缨髓,鬃捍裙奖冢哄绊ュ韵萸戴用А鳍袋:原栽培养熬细胞呈援澎或纺锤影。第二代麴鼹在分讹踌弊蒸作殿下,缀胞闻发生融合、形成腿管的鑫疑力爨监增强。嚣蓑:建立一罄穗定夔搏癸努蒜,壤养嚣蕤定蠡巷惑受疆蘩滤辫方法。褥攀令援缨憝。进行逡皮翟缨藏懿,,鱲焚瀣繁竞搬包及萁鳓合,摄取氖笛椤结蹙:态皮褪绒魏蜓,,蛌免疫荧光絷媳蚜呈辩裢,菇黼缩台⑸汜薬。缭谂:通过本方法培养褥劐瓣斓憨骥镶势露皮褴缨簸。目的:研究内肢襁细胞体外向内皮细胞诱导分化时的表型燮化。秀浚:选取生长整好熬爨代冁嚣整髫藤天每天滚孑黾投鼷缭禁:这些耩意丧缨您生长瓣不露辩羧表达不~,线蹬棼戆蒸焓鹞阂赫猓了。.停谀⑻熳钇鳎:梗嚣菰嚣寝遮逐绪谂:通过本方法培养褥劐瀚蹋飘缝度灏、活健鲟,确系臀潞飙卫厦方法:抽取大鼠动赫巍,应搿密度梯度离心的方法获定,行,,璿瓣兔瘸菠竞染色。细胞。盖尊摹艉聊踝妒枯詈兆寸文鼙茹
第霆矸制摅晡♂诘赞腊灸胫匦侨纫旗对想性心肌粳死的治疗方法:速减弱,繁熹钍А谂嘌傅天辩始表达,分魏为,%,开始表达,为。ィ院笾痄銮浚瑅为,.ァ结论:造血干细胞的表型柱体外仍不臼黩被维持,予细胞一旦被从造盘秧环境中分离塞螽虢会分纯,膊徽”妗莲鲮:探讨螽体态皮褪缀髓及与卫星缨胞联合移植对梗死心腿缝搀取各缝缎织标本,及离钵心飘腿条,维织切片染色观察组织基本结构、镒因子染色观察盘管新生情况、体外刺激离体脱条稔测心舰收结梁:穆撞趱与瑟瑟缢魄较,染氇显示胶菰纤维熬合羧少,组襄结构排列熬本处于材序状态;出现明显的血管新生;移植组。账趿γ显裹予对照缝,虽菠时闻推移恢复器囊骞增龆。结论:梗死心肌经细胞移植后可对梗死一橹峁蛊鸬奖;ぷ鼹,并可健使盘管瓤生及攫死,§腿收缠力恢复。联合移撩组对急性,§梗鲶治疗作用龋优于单一细胞移植组。第熳钋浚士%以爝表达迅遵减弱,第煜А5天时第焓盕,泶镂猼%。缩情况。及功能的掰响。上膏摹蔫麟竹土季士季■幡●文尊蒜
耙虎蟆!獀——Ⅷ●—!!!!薄—!猑——————”!!乱弧!!!!!!!R第弧部分骨骼肌卫星细胞艏血管内皮祖细胞佟用的影响方法:澈各组缀缀标本,避行、染色。绩采:鼗合蠲鼹穆棱治疗缀壤嚣区,褒达蹑窕伊琛与淘皮缨熬缀狸应帮霞楼毵送有鼓蒲差异谬《,翼熬:搽讨在体霸鸯髓飘墨厦躺魏对滤皮攘细驻嚣嗣麴影确。结论:骨骼肌卫撼细胞与舰镣内皮祖细胞的促血铃澌生作用具黼协溺佟爱。褒‘嚣缓攫残心瓤瞧缭宓褒复鞲辍苫妻&磷犍舅驴十靖泞各毽乓鞋浆摄裰媳有翡显缝谛攀意曼诤‘谯∞并鞲台簸毒攀融移褴番壤榴毪誊鞲燕臣齐Ⅲ贾媚贰丁煲弧辧点蚌隶誊馨士季曩静文妊对照疆搿茹:∞联食缀群璐章文羹蒜⒘剖屯慷哉战荻到酉酝郴湔拼酪濉禤《甇啊铟嗄竦ザ厘绺榆斩腥疗窍布浞炀渤敢庖‘!飨赴扑蠼楣K佬募∈账趿λ媸奔渫埔苹指锤饪抵鸾ピ黾驴豪毒。各缒徽盎赞鞲熏毙鞍￡茁±臧曛萘鹻爆郴∞慧懿水聪奄箍醚猯。》瘟频蛔耗穸哉甄陡屙