文档介绍：头花蓼愈伤组织诱导及分化
摘要:研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS>1/2MS>B5;MS+6-BA +NAA ;MS+6-BA 4mg/L+NAA ;MS+6-BA 8mg/L+IBA ,%,。培养基中附加100mg/L活性炭,%,愈伤组织生长和分化效果较好。
关键词:头花蓼;叶片;茎段;愈伤组织
中图分类号 S58 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2013)17-21-04
花蓼(Polygonum capitatum Buch.- )别名四季红、铜矿草、石辣蓼、石莽草等,属蓼科蓼属多年生草本植物,我国主要分布于西藏、广东、四川、湖北、广西、云南、贵州等省区,印度、越南也有生长,其中在我国有17种、7变种,资源十分丰富。头花蓼是一种理想的彩叶花卉植物[1],具有较高的观赏价值,可作为垂直绿化、边坡护理、地被绿化和观花等的良好材料推广应用[2];也是一种重金属耐受植物,在废弃地的植物重建、修复中具有广泛的应用价值;同时头花蓼全草均可入药,有清热解毒、祛风止痛、去腐生肌的作用[3-4]。
头花蓼需求量大且野生资源有限,快速繁育体系可以有效解决原料供应不足的问题。头花蓼组织培养方面,尤其是愈伤组织培育研究较少。毛堂芬[5]和龙祥友[6]分别以头花蓼带节茎段、茎尖为外植体进行组培快速繁殖。笔者以头花蓼的叶片、茎段为外植体,通过组织培养手段建立无菌培养体系,研究了不同类型外植体、消毒方法、培养基类型、活性炭、植物生长调节剂等因素对其愈伤组织诱导的影响,为头花蓼愈伤组织的培育提供理论依据。
1 材料与方法
材料供试材料头花蓼采自重庆北碚缙云山,后栽植于西南大学园艺园林学院园林植物与栽培育种实验室,进行常规管理。
试验方法
2种外植体的最佳消毒方法筛选摘取头花蓼刚展开叶片和不带芽茎,在流水下冲洗1h,用蒸馏水反复冲洗3次。在超净工作台上,先用75%酒精进行表面消毒处理10~20s,%HgCl2溶液浸泡2、4、6、8、10min,以及10%NaClO浸泡3、6、9、12min。外植体消毒后,用无菌水冲洗5次,无菌滤纸吸干表面水分,,茎段切成1cm左右的小段,在无菌的条件下接种在无激素的MS培养基中。每瓶接种3个外植体,接种10瓶,每组设3次重复。每3d记录外植体污染数和存活数一次,以30d为周期统计其污染率和死亡率。
愈伤组织诱导
3种培养基对愈伤组织诱导的影响取已建立的无菌体系苗,将切取好的叶片、茎段分别接种于含有6-,、1/2MS、B5的3种培养基上。
6-BA与NAA组合对外植体愈伤组织诱导的影响选择以上最佳培养基,分别以6-BA