文档介绍:第五章
细胞生物学研究方法及其在中医研究中的应用
一些基本的问题,请大家思考:
、动物、细胞作为实验对象的异同?
?
有没有有利的地方,优越于人的?
?
似乎还不如动物,连整体都没有了,如何用药、如何辨证、如何整体观?有没有有利的地方,优越于动物的?
?
能不能举一些例子?
比如你们开展的探索性实验。
通常中药复方面临的系列学术问题:
1)有无作用;2)哪些组合、配伍、药物有效;3)药物的有效部位、成分、及其组合;4)被调控的组织、系统、器官; 5)被调控的基因、基因组;6)整个调节链、网;7)如何提高疗效……
对此,细胞生物学能做什么?
教材引言部分
细胞生物学研究内容广泛,主要包括以下几个方面:1)细胞的结构和化学组成。2)细胞及细胞器的功能。3)细胞的增殖与分化。4)细胞的衰老与死亡。
细胞培养是指细胞的体外培养。具体地说,是在无菌条件下,把动物或植物的细胞从有机体分离出来,置于培养器皿中,在一个合适的环境中给以营养物质,使细胞能继续生存和生长的一种方法。
组织培养、器官培养,如果体外培养的是组织、器官或器官原基,则称为组织培养或器官培养。
(1)因素单纯:培养细胞不受体内各种复杂因素的影响。
(2)实验条件易控:人为改变培养条件,即可观察细胞在单因素或多因素影响下的生理改变。
(3)重复性好:可避免种属及个体之间的差异。
(4)方法简便:便于使用各种技术方法观察研究活细胞的形态结构和生命活动。
(5)经济、快速:节约动物及药物,可在较短时间内获得较多的实验样品和研究结果。
(6)便于应用人体组织。
(7)结果易于分析。
以上(5)实质是两个部分:
经济(实验成本低):节约动物、药物;
快速(实验周期较短):可在较短时间内获得较多的实验样品和研究结果。
比较:离体和在体研究的利弊。
解释“离体”和“在体”。
那么“在体”的优点有没有,是什么?
实验动物整体实验的优点
1)保持了机体的完整性,神经、体液、脏腑、组织、药物代谢,等。
2)符合临床用药。
3)取材不受限制,创伤实验不受限制(不伤害人,或人不可以的实验)。
4)数量满足方便。
实验动物其他优点与细胞培养类似,即相对于人而言:
5)实验条件易控:人为改变培养条件,即可观察细胞在单因素或多因素影响下的生理改变。
6)重复性好:可避免种属及个体之间的差异(纯系动物)。
7)方法简便:便于使用各种技术方法观察研究活细胞的形态结构和生命活动。
8)结果易于分析。
9)经济:节约药物和其他费用。
10)实验周期较短。
(1)观测不同组织细胞的生物特性及其中医药调整作用。
(2)观测不同肿瘤细胞,了解中医药对生物学特征,包括转移、分化、凋亡等影响。
(3)细胞系,目的同上,而细胞稳定,而以上原代细胞的部分生物特性,可能会逐渐消失。
(4)工具,主要为细胞系,作为一种载体使用。比如研究基因的表达与调控,经常使用报道基因技术、哺乳类载体技术、基因转移技术,等(简单介绍)。
第一节细胞生物学研究的主要技术
一、细胞培养技术
主要包括:细胞体外培养的一般条件、细胞培养的基本步骤、培养细胞的生长与观察。
(一)细胞体外培养的一般条件
细胞需要生长在具有充分营养物质的培养基中,培养基含有的成分:
(1)含氮化合物:是蛋白质和核酸的基本构筑材料,动物细胞至少需要12-13种氨基酸。