文档介绍：优
秀
毕
业
设
计
论
文

二0 年月
大鼠支气管哮喘模型建立及心肌细胞一泶镅芯中文抽导师:刘敏副教授研究背景及目的:支气管哮喘病理生理学研究发现支气管哮喘易于并发心肌损害。作者曾对例支气管哮喘猝死病例进行病例形态学研究,发现支气管哮喘除肺部病变外,还并发心肌细胞萎缩、坏死和瘢痕形成。支气管哮喘患者心肌损害的机理尚不清楚。另外有学者报道支气管哮喘常用治疗药肾上腺素可能促进心肌细胞凋亡。本实验目的是通过哮喘模型的建立以及应用不同的药物治疗来分析心肌细胞损害的机理。方法:健康雄性大鼠唬婊治U6哉兆椤⑹笛槎哉兆椤⒉恢瘟谱椤肾上腺素治疗组、氨茶碱治疗组以及肾上腺素氨茶碱联合治疗组六个实验每组又分为四小组,每小组淮笫蟆S谑笛榈、、、分别处死大鼠。应用免疫组化技术对凋亡促进因子凋亡启动因子表达进行研究,用/枷穹治鱿低扯匝粜越6哉兆榧笆笛槎哉兆閟坌源笫髉、呈阴性表达,随实验时间的延长,表达强度无表化;魇笛樽樾募∠赴鹥、阳性表达。表达面积及面积灰度积在第芙隙哉兆楦,随着时间的延长阳性信号表达面积及面积灰度积逐渐上升,第埽锔叻濉研究生:杨静组,果进行半定量测定。结果:四川大学硕士学位论文、
:现瘟谱榻掀渌榈,∮兴鸷ψ饔谩錾舷偎骺赡艽俳募∠赴蛲觯辈杓钜┪锕辔钢瘟贫孕募∥匏鸷ψ錾舷偎匕辈杓盍:现瘟屏俅仓瘟菩Ч谩⑿募∠赴鸷η帷Sτ眯〖砸晌O勒撸杉觳鈖、作为辅助诊断。关键词:琧一┪锔弊饔结论:用。量多种药物治疗支气管哮喘既可以缓解哮喘发作症状、也可以尽量减少药物的副作用。心川大学硕士学位论文
!:.』,—.,—琫琣瓻
...畉.:.簍四川大学硕士学位论文.,,甌’’..,‘
塑型奎兰璧主兰垡笙兰—一————————————————————————————一簆,琣琧。。畊“。。皒·。。“啊
前言支气管哮喘是一种以呼吸道炎症、呼吸道高反应性和呼吸道重塑为特变外亦有肺外器官的损伤。作者曾对例支气管哮喘猝死病例进行病理形态学研究,发现支气管哮喘猝死者除肺部病变外,同时心肌细胞发生萎缩、坏死和瘢痕形成。心肌损害的机制不明。支气管哮喘常选用氨茶碱及儿茶酚胺类药物如肾上腺素等进行治疗。,≡裥宰饔茫锏浇痉作用。近年来的研究表明,儿茶酚胺类药物可能与心肌细胞凋亡关系密忍逋庋芯糠⑾秩ゼ咨錾舷偎乜墒剐募∠赴蛲觯拮抗剂可以抑制该药物效应,而选择性作用于的药物对于心肌细胞凋亡的热说难芯糠⑾,通过通路引喘发作时,交感神经系统兴奋性增高,儿茶酚胺药物治疗,均会对心肌产生影响。支气管哮喘患者心肌损害是单纯哮喘缺氧所致或是药物所致值得研究。该研究既有助于临床医学合理用药,亦有助于法医病理学中对哮喘迄今为止,尚没有专门针对支气管哮喘心肌损害机理的研究报道。本课题通过建立支气管哮喘动物模型对心肌细胞损害的机制进行研究,旨在为支气管哮喘患者心肌损害的早期诊断、预防及治疗提供依据,指导临床合理用药,为法医病理学支气管哮喘猝死的诊断提供依据。征的疾病。病理生理学研究和临床实践中均发现支气管哮喘患者除肺部病通过与荷錾舷偎厥芴切。影响不大。起心肌细胞调亡,ざ蛲ü鼼芬种葡赴蛲觥V芟猝死的诊断。四川大学硕士学位论文
第一部分支气管哮喘动物模型的建立建立支气管哮喘模型的动物有很多种。大鼠呼吸道反应性特点与人比较接近,繁殖快,价廉易得。近年来采用大鼠制作哮喘模型日益增多。本实验采用卵白蛋白建立大鼠的过敏性哮喘模型。げ牧虾头椒实验仪器及主要试剂氢氧化铝粉剂虾J薪鹕交こ超声雾化吸入器暇┑婪乙搅破餍党实验动物及分组大鼠只,雄性,体重伤拇ù笱笛槎镏行奶峁随机分为对照组和实验组,其中对照组分为正常对照组和实验对照组。致敏阶段:实验组于大鼠胸部皮下注射含卵白蛋白和氢氧化铝的生理盐水配制后甤冰箱过夜,用时混匀周后再注射一次。实验对照组于大鼠胸部皮下注射含氢氧化铝的生理盐水周后再注射一次。正常对照组不做任何处理。激发阶段:实验组动物第巫⑸鋖周后,将大鼠放入自制的不完全封闭的有机玻璃箱卵白蛋白每日超声雾化吸入徽6哉兆椴蛔鋈魏未怼于末次激发后,将大鼠脱颈处死。即刻切开气管,经气管全肺灌注,分次注入共生理盐水,反复抽吸危没厥找约,作白卵白蛋白每组弧笛榉椒冢看只,每日超声雾化吸入ヂ寻椎鞍咨硌嗡,连续吸;实验对照组以生理盐水代替细胞计数;山顿细胞离心机痬离心,沉淀用苏木素一伊红,四川大学硕士学位论文
染色,作白细胞分类计数。大鼠致敏激发后立即表现为:呼吸急促,出现明显的腹式呼吸,呼吸节律不规则,行动迟钝、竖毛、毛色失去光泽。大小便失禁。实验组肺泡灌洗液与对照组相比,白细胞总数和嗜酸性粒细胞的百分尽管豚鼠过去