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二0 年月
急性心肌缺血、及的免疫组织化学研究摘—弋结果:毙孕募∪毖J盚旧ü饩倒鄄旖黾募∏岫要和及阳性表达情况,为急性一已毖K滦脑嘈方法:⒋笫蠹毙孕募∪毖DP停唤淮笫笏婊分为椋孔只:槲U6哉兆椋珺獴榉直鹞缺血边缘区及非缺血区心肌组织石蜡切片进行染色光镜观彳奔洌募∽橹毖G⑷毖1咴登胺侨毖G鳰比猝死的法医学诊断提供客观的形态学依据。冠状动脉结扎、、、∈、察和超薄切片透射电镜观察;τ妹庖咦榛鬝法做、及染色;庖咦榛旧ń峁型枷蠓治淤』、水肿和波浪样改变。募∪逼/∈奔纯蒆。现表达增强,至缺血∈贝锝8叻澹笃轿萔筚;缺骸綥以外目的:』、玫缇怠⒚。缺染,随缺』奔溲映ぃ比痉陡羯叫∑簕犬、条:⒋『/山西医科大学
蛾纤维细胞生长因子;血管内皮生长因子势,,⑹迸┐锴慷扔肴眎嗟薄#特异、便捷的方法。\关键词:急性心肌缺血;免疫组织化学;肌红蛋白;碱性\区在缺∈焙罂J急泶铮粜员泶锴慷让飨匀鮦逼结论:急性,,在缺∈蹦冢琤癡粜耘┐镂莱中鴉:升趋合秩笔В及表达增强,可为心肌缺血早期诊断提供灵敏、
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变具有较高的敏感性,但是都受实验条件和特异性及易死后组工作。为此,寻找能对心肌缺血做出早期诊断的方法就显得非常重要。本实验应用大鼠建立急性心肌缺血的动物模型,并对在为早期一缺血的法难д锒涎罢乙恢志哂懈叨攘槊粜云健无论是肉眼观察还是常规病理学检查都不能发现典型的心肌缺Ⅱ病变,仅可见冠:状动脉散在的粥样硬化斑块。因此,法医病理学检验难以作出准确的心肌缺血诊断。对此国内外学者已做过不少研究,包括心肌特殊染色、电镜观察、酶组织化学染色、免疫荧光技术等。这些方法对早期心肌缺血的心肌病理改织自溶等因素影响,尚难以应用到法医病理学对募大鼠急性心肌缺血早期心肌缺血区、边缘区和非缺血区的肌红蛋白,⒀9苣谄どひ蜃,忻庖咦橹а芯浚急性心肌缺突然急骤,并可在短时间内死亡:。往往由于缺血时间短,死后,⒓钚猿上宋赴ひ蜃特异性的渗断方法。,足一、脏性猝死琒淖畛<颍⒉《
材料和方法至无血性积液,恢复正常呼吸后,结束人工呼吸。┞缎脑啵米笫盅蛊茸笮约梁鸵瞧随机分为椋孔只,其中对照组为椋笛樽楦笫蠹毙孕募∪毖6锬P椭票管,开胸后行正压人工呼吸,胸骨左侧约鸭靶脑嗖ǘ及腹部,将心脏挤出胸腔外,以左冠状静脉为标志,于左心耳根部下方耄詏/肯叽┕募”聿悖诜味圆锥旁出针,结扎左冠状动脉,观察被结扎血管支配区心肌颜色变暗,结扎成功。然后放回心脏并关闭胸腔,保留负压引流不同时间完整取出心脏,以%福尔马林固定。正常对照组动物手术方法同实验组,但只穿线不结扎冠状动脉。、免疫组化试剂盒选州武汉晦士德公刊产¨,一抗二二抗均为兔抗鼠;免疫组化试剂盒选用福建迈新公刊产。,,一抗二抗均为兔抗人;,雌雄吖体重冠状动脉结扎时间不同分为组:结扎椋籅椋航扎组:组:结扎组;组:结扎组;组:结大鼠用ノ彀捅韧啄痥骨宦樽砗螅⒓雌懿扎组;组:结扎组。
取各组缺区、边缘区和眒缺心肌组织创者【』保芯糠椒缇倒鄄庖咦橹旧色方法按试剂说明书进行,以厂家提供对照切片做阳性对照,枷蠓治黾巴臣蒲Т系统;电镜观察使用透射电镜。9鍴旧取各组缺血区、边缘区和非缺血缺心肌组织制作超薄切片,用透射电镜,分别光学电子放大倍,观察心肌细胞的超微结构变化。取各组缺血区、边缘区和非缺血缺心肌组织石蜡切片,应用免疫组织化学超敏ㄗ黾『斓鞍⒓钚猿上宋胞生长因子、血管内皮生长因子染色。染以〈、免疫组织化学染色的阳性反应物进行定量分析,具体操作为:每张切片随机选取商倍视野,测定一定面积内阳性信号丽积与测定面积的比值,汁算阳性指数,招孕藕拧灰度值×阳性倍号面积与测定而积的比值;通过测定免常规染笆,光镜下观察细胞形态改变。组织化学染色缺染区面积与测定区而积的比值,判断缺失程度。所得数据进行实验组与对照组比较,实验组缺区、边
庖咦橹旧缇倒鄄结果9鍴旧正常对照组一籺胞均染色清晰,横纹清楚,细胞核正常对照组心肌细胞超微结构正常,丰富的线粒体和肌原裂,∷嫒盝寸映ぃ杉岫让竚管淤血、水肿及部分心肌纤维波浪样改变,未见其他病理改变纤维相间排列,肌节排列整齐,线粒体多呈卵圆形,嵴清晰紧冠状动脉结扎小时组,可见缺血区心肌细胞线粒体肿胀、嵴短缩,电子密度降低;结扎小时组,肌