文档介绍：FNCPLSDM00106 稻米-黄曲霉素 A 的测定-用硅胶纯化的高效液相色谱法

F-NCP-LS-DM-00106
稻米-黄曲霉素 A 的测定-用硅胶纯化的高效液相色谱法
1 适用范围:
本方法为欧洲标准,适用于含量大于黄曲霉素 A 的测定。
2 原理概要:
试样用盐酸进行酸化,及氯化镁增强离子强度后,再用甲苯对黄曲霉素 A(OTA)进行抽
提。抽提液用小型硅胶色谱柱进行纯化,黄曲霉素 A 用反相高效液相色谱(HPLC)测定,及用
荧光进行识别和校正。如果需要,试验结果可通过在甲醇溶液中用三氟化硼衍生物进行校验。
3 主要仪器和试剂:
仪器:
常规实验室仪器,主要有:实验室用磨粉机; 旋转蒸发器; 机械振荡器;分光计;离
心管和冷却离心机;固相抽提柱;溶剂罐;膜过滤器;微型注射器;HPLC 装置。
主要试剂:
分析时,除非特别说明,否则应用分析纯级试剂。水要用蒸馏水或符合 EN ISO3696 的
一级。溶剂应是 HPLC 级。主要试剂有:无水硫酸钠、冰醋酸、盐酸溶液、氯化镁溶液、乙
腈、甲苯、正己烷、二氯甲烷、丙酮、乙醇、溶剂混合物 I(甲苯/冰醋酸 99/1 混合液)、溶
剂混合物 II(丙酮/甲苯 5/95 混合液)、溶剂混合物 III(甲苯/冰醋酸 90/10 混合液)、流动
相、三氟化硼及其甲醇溶液、黄曲霉素A 及其标准溶液、黄曲霉素A 校正液、次氯酸钠溶液。
4 过程简述:
样品制备:
试样磨粉直到能全部通过筛子,并混合均匀。称取约 20g 试样,精确至。放入锥
形瓶中,加入盐酸和氯化镁,搅拌后,加甲苯,然后进行萃取,得到黄曲霉素 A 溶液。
测试:
进行 HPLC 测定。测定前先做校准曲线及黄曲霉素 A 识别。
5 精确度:
重复性:同一分析者应用相同装置连续分析两次,绝对偏差超过重复限 r 的不能超过
5%;再现性:不同实验室、不同分析者,采用相同方法不同设备得到的结果,两次绝对偏差
超过再现限 R 不能超过 5%。
6 来源:
国际标准化组织,ISO 15141-1:1998(E)