文档介绍：FNCPLSDM00107 稻米-黄曲霉素 A 的测定-用碳酸氢盐纯化的高效液相色谱法

F-NCP-LS-DM-00107
稻米-黄曲霉素 A 的测定-用碳酸氢盐纯化的高效液相色谱法
1 适用范围:
本方法为欧洲标准,适用于含量大于 3μg/kg 黄曲霉素 A 的测定。
2 原理概要:
用氯仿-磷酸水溶液从谷物中抽提出黄曲霉素 A,并通过液-液分离,使之进入碳酸氢盐水
溶液。溶液用 C18 萃取柱萃取,黄曲霉素 A 用乙酸乙酯-甲醇-乙酸进行洗提。黄曲霉素 A 用反相
高效液相色谱(HPLC)分离,用荧光进行识别和定量。
3 主要仪器和试剂:
仪器:
常规实验室仪器,主要有:实验室用磨粉机;高速混合器;分光光度计;玻璃纤维过滤器;
平底漏斗;布氏漏斗;槽纹滤纸;分液漏斗;离心机;吸附柱;真空歧管;膜过滤器;HPLC 装
置;固定体积注射器。
主要试剂:
分析时,除非特别说明,否则应用分析纯级试剂,水要用蒸馏水或符合 EN ISO3696 的一级
水。溶剂应是 HPLC 分析级。主要试剂有:氯仿、磷酸、硅藻土、碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯、甲
苯、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸洗提液、流动相、甲苯/冰醋酸混合物、三氟化硼
及其甲醇溶液、黄曲霉素 A 及其标准溶液、黄曲霉素 A、黄曲霉素 A 贮备液及校正液、次氯酸
钠溶液。
4 过程简述:
样品制备:
试样磨粉直到能全部通过 1mm 的筛子,并混合均匀。称取约 50g 试样,精确至。放入
混合器瓶中,先加入氯仿和磷酸,以中速进行混合,快结束时,再加硅藻土。进行抽提,过滤
并收集至少 50mL 滤液。滤液中加入碳酸氢钠溶液,并轻轻摇动。收集顶层水相进行萃取抽提,
得到黄曲霉素 A。
测试:
样品制备后,立即进行 HPLC 测定。测定前做校准曲线。
5 精确度:
重复性:同一分析者应用相同装置连续分析两次,绝对偏差超过重复限 r 的不超过 5%。再
现性:不同实验室、不同分析者,采用相同方法不同设备得到的结果,两次绝对偏差超过再现
限 R 的不超过 5%。
6 来源:
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国际标准化组织,ISO 15141-2:1998(E)

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