文档介绍：【摘要】将蟾蜍的心脏完整离体,插入挖心套管,分别用***化钠,***化钾,***化钙,肾上腺素和乙酰胆碱处理,可观察到不同药物对心脏的影响。***化钠,***化钾与乙酰胆碱均使心搏减弱,***化钙与肾上腺素能加强心脏收缩力和心率。
【实验材料】
动物:中华蟾蜍
试剂:5%***化钠溶液;1%***化钾溶液,2%***化钙,任氏液(Ringer’s solution),1:100000肾上腺素溶液,1:100000乙酰胆碱溶液,任氏液
器材:蛙类手术器械,BL420E+生物机能分析系统,张力换能器,蛙心套管,试管夹,滑轮(杠杆)
【实验内容】
离体蟾蜍心脏的制备
(1)取一蟾蜍毁其脑和脊髓,仰位固定于蛙板上,暴露心脏。
(2)心脏插管分支前的主动脉下穿一线并打一松结备用,左侧主动脉穿一根线并结扎之,用左手提起结扎线,右手用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一“V”型口。将盛有少量任氏液的蛙心套管(用拇指将套管堵住,以防套管中的任氏液流出)从“V”型口插入动脉球底部,然后稍后撤套管,再转向心室中央方向插入,可见液面随心搏升降即可。将分支前主动脉下的松结扎紧,并固定在套管的小突上。小心提起套管和心脏,剪断主动脉左右分支;结扎与静脉窦相连的后腔静脉,并在结扎线以下剪断,将心脏摘出。
(1)开启系统,描计一段正常心搏曲线。注意观察心跳频率和强度以及心脏的收缩、舒张程度。
(2)向蛙心套管内滴加5%NaCl溶液,观察心跳变化。
(3任氏液洗脱,待心跳恢复,加入2%***化钙溶液1~2滴,观察心跳变化。
(4)任氏液洗脱,待心跳恢复,加入1%***化钾溶液1~2滴,观察心跳变化。
(5)任氏液洗脱,待心跳恢复,加入1:100000肾上腺素溶液2~3滴,观察心跳变化。
(6)任氏液洗脱,待心跳恢复,加入1:100000乙酰胆碱溶液1~2滴,观察心跳变化。
【实验结果】
加入各种药品后心脏心搏曲线变化如图所示
图一:NaCl对心脏的影响
图二:Kcl对心脏的影响
图三:CaCl2对心脏的影响
图四:肾上腺素对心脏的影响
图五:乙酰胆碱对心脏的影响
【实验讨论】
1、滴加***化钠溶液,心跳显著减弱。
心肌细胞的收缩对细胞外的浓度有很高的依赖性,因其是触发心肌质网释放的关键。当在任氏液中滴加***化钠时,Na+与内流的竞争性抑制导致内流减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
若细胞外离子浓度低至接近零时,虽然心肌细胞仍能产生动作电位,但没有的内流,不能引起收缩。即“兴奋-收缩脱耦联”。
2、滴加***化钾溶液后,心跳减弱至停止
本实验所用的***化钾浓度对于蟾蜍体液来讲属于较高浓度,而细胞外K+浓度较高时K+与有竞争性拮抗作用,K+可抑制细胞膜对的转运,使进人细胞内减少,心肌的兴奋一收缩耦联过程减弱心肌收缩力降低。且当细胞外K+浓度较高时,膜内外的K+浓度梯度减小,静息电位的绝对值过度减少,Na+通道失活,心肌的兴奋性完全丧失,心肌不能兴奋和收缩,停止于舒张状态。
此时,仅由来构成动作电位,钙通道激活慢,因此去极化上升幅度小而缓慢,使兴奋传导性降低。
而当K+浓度增高值不大时,由于膜对K+的通透性较大,静息电位主要由细胞内外K+浓度差决定,当K+浓度稍升高时,静息电位升高,与阈电位差值减小,使细胞兴奋性增加。当细胞外K+浓度升高时,细胞膜对钾的通透性升高,心室