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摘要:、pH值以及温度、pH值、金属离子和表面活性剂对酶稳定性的影响。试验研究表明:该酶最适作用温度为55℃,,酶在55℃反应45min仍有50的酶活力,热稳定性较好。金属Ca2 和表面活性剂Tween-80对酶有一定的激活作用,但激活作用
不太明显。关键词:枯草芽孢杆菌;中性蛋白酶;酶学性质;
中国分类号::A
中性蛋白酶是一类适合于在中性条件下水解蛋白质肽键的酶类,最早被发现并广泛应用于工业化生产,可用于皮革脱毛、动物血液蛋白酶水解制备复合氨基酸营养液[1]、大豆蛋白水解[2]以及医学治疗[3]等应用领域中。目前国内外有关中性蛋白酶的研究相当的多[1-7]。酶作用条件不是酶的特征性参数,因环境的改变而改变,酶活力不仅受温度、pH的影响,而且还易受到金属离子、表面活性剂等环境因素的影响。因此,本试验着重考察了酶反应体系温度、pH值、金属离子以及表面活性剂对酶作用条件及稳定性的影响,,为其应用奠定良好的理论基础。
1材料与方法

,经初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。

[8]培养基配方略。
[9]培养基配方略。

、。
-酚法[10]
℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃不同温度下反应,测定其蛋白酶活力。以温度为横坐标,相对酶活力为纵坐标作图。
(~)不同的1的干酪素溶液,按Folin-酚法[10]进行蛋白酶活力测定。以pH为横坐标,以相对酶活力为纵坐标作图。--柠檬酸缓冲液配制,-,,-NaOH缓冲液配制。
℃恒温水浴10min、20min、30min、40min、50min、60min,然后测定其残存酶活力,以时间为横坐标,相对酶活力为纵坐标作图。
,分别取20ml稀释酶液于40℃、50℃、60℃、70℃保温30min,测残余酶活。以温度为横坐标,相对酶活力为纵坐标作图。
,保温30min,测定蛋白酶活力,以金属离子作横坐标,蛋白酶活力作纵坐标作图。
(1-5ml),于40℃保温30min,然后测定其蛋白酶活力。以Tween-80添加量作横坐标,酶活力为纵坐标作图。
2结果与分析

细胞杆状,成链