文档介绍：·532· 中国药理学与毒理学杂志 2011年 12月第 25卷第 6期 ChinJPharmacolToxicol,Vol25,No6,Dec2011
腺苷诱导人食管癌 EC109细胞凋亡及其内质网分子机制
韦碧柳1,李1,蒲泽锦1,黄官友2,冯家琳3,叶艳清1,吴灵飞1
(汕头大学医学院第二附属医院 ,,,广东汕头 515041)
摘要:目的探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌 EC109细胞凋亡中的作用。方法腺苷
2mmol·L-1作用于 EC109细胞 24~72h或腺苷 ~4mmol·L-1作用于 EC109细胞 36h,MTT法观察腺苷
对 EC109细胞存活率的时效和量效关系;免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白 78(GRP78),胱天蛋白酶 4,胱天
蛋白酶 3,转录因子 CHOP和核因子κB(NFκB)的表达及亚细胞定位;原位末端转移酶标记技术检测细胞
凋亡;Western蛋白印迹法检测内质网应激相关蛋白表达。结果腺苷对 EC109细胞生长具有明显的抑制作
用。腺苷 2mmol·L-1与 EC109细胞作用 24,36,48和 72h,细胞存活率分别为(±)%,
(±)%,(±)%和(±)%,呈时间依赖性下降(r=,P<);腺苷 ,1,
2和 4mmol·L-1与 EC109细胞作用 36h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(±)%,(±
)%,(±)% 和(±)%,呈浓度依赖性降低(r=,P<)。腺苷 ~4
mmol·L-1与 EC109细胞作用 36h,细胞凋亡率分别为(±)%,(±)%,(±)%和
(±)%,与对照组(±)%相比均明显增加(P<)。腺苷 2mmol·L-1与 EC109细胞作用
36h,与正常对照组相比,GRP78、胱天蛋白酶 4、胱天蛋白酶 3和 CHOP表达明显增强(P<,
P<),胱天蛋白酶 4,胱天蛋白酶 3和 CHOP发生核易位。GRP78、胱天蛋白酶 4、胱天蛋白酶 3、CHOP
和 NFκB表达呈浓度依赖性增加(rGRP78 =,r胱天蛋白酶4 =,r胱天蛋白酶3 =,rCHOP =,
rNFκB =,P<)。结论腺苷可诱导人食管癌 EC109细胞凋亡,其分子机制可能与内质网应激凋
亡途径的启动有关。
关键词:腺苷;细胞凋亡;内质网;应激;EC109细胞
中图分类号:R285,R963 文献标志码:A 文章编号:10003002(2011)06053206
DOI:.1000
腺苷是人体内重要的生物信号分子,正常情况 1 材料与方法
下维持在极低浓度水平,通过不同的腺苷受体发挥
生理调节功能[1]。然而,体外高浓度腺苷却可通过药物、试剂和仪器
线粒体途径[2]或其死亡受体途径[3]等不同机制诱