文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
丙烯酰胺对大鼠神经行为的影响及褪黑素干预作用的研究
姓名:朱兰兰
申请学位级别:硕士
专业:卫生毒理学
指导教师:严红
2011-01
华中科技大学硕士学位论文
丙烯酰胺对大鼠神经行为的影响及褪黑素
干预作用的研究
硕士研究生:朱兰兰
指导老师:严红副教授
摘要
丙烯酰胺( acrylamide )是广泛用于生产化工产品聚丙烯酰胺的白色晶
体物质,常用于净化处理水,加工纸浆等。淀粉类食品在高温(>120℃)烹
调下容易产生丙烯酰胺,人体可通过消化道、呼吸道、皮肤黏膜等多种途径接触
丙烯酰胺。油炸和烧烤的淀粉类食品,如油条,油饼,炸薯条等含有的丙烯酰胺
含量,比世界卫生组织(WHO)规定的饮用水允许最大限量( μg/L) 高出500
多倍[1]。动物实验研究表明丙烯酰胺主要引起神经毒性,还有生殖及发育毒
性,但在人类主要表现为神经毒性。神经毒性主要为周围神经和中枢神经系
统的退行性变,急性或亚急性中毒以中枢神经系统障碍为主,慢性中毒以周围
神经病为主,目前具体作用机制未完全阐明。
褪黑素(melatonin,MT)是松果体分泌的主要激素,可调节情绪、睡眠、免疫、
性行为及生殖等多种生理功能,也可调控衰老,肿瘤生长和某些老年病的发生及
发展。上世纪90年代,报道称MT是一种高效的自由基清除剂,具有极强的水溶
性及脂溶性,可以穿过体内多种生理屏障,能有效清除过氧烷自由基、羟自由基、
超氧阴离子等,降低体内的氧化损伤以及上调抗氧化酶的活性,可用于防止老年
性痴呆(AD)、神经退行性病变帕金森病(PD)以及亨廷顿病等方面。
本研究在 ACR 亚急性染毒导致大鼠神经行为损伤的基础上,研究 MT 同时
干预对 ACR 所致神经行为的损伤,中枢神经系统氧化损伤以及 DNA 损伤的影
响,以探讨丙烯酰胺亚急性中毒特征及可能的中毒机制,为探索防治丙烯酰胺中
毒的方法提供实验依据。
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华中科技大学硕士学位论文
第一部分 MT 干预前后 ACR 对大鼠神经行为毒性的影响
目的:探讨 MT 同时干预前后 ACR 染毒对大鼠神经行为毒性的影响。
方法:动物分 4 个组,分别为对照组,ACR 组(40 mg/kg),MT 组(5 mg/kgMT),
MT+ACR 组(5 mg/kgMT+ 40 mg/kgACR),每组 9 只。每天上午 10:00,ACR
组以 40 mg/kg ACR 灌胃染毒,对照组灌胃等容量的生理盐水,MT 组腹腔注射 5
mg/kg MT,MT+ACR 组腹腔注射 5 mg/kg MT 并同时灌胃 40 mg/kg ACR,连续
12d,于第 0,3,6,9,12 d 测取动物的体重,步态分值,甩尾时间,后肢撑力
等。第 12 d 灌胃 24 h 后,各组大鼠均断头处死,在冰盘上分离大脑皮层,小脑
及坐骨神经,预冷 PBS 缓冲液洗净,干净滤纸吸干后置于新鲜配制的福尔马林
固定液中,进行 HE 染色。
结果:(1)与对照组相比,ACR 组的大鼠体重于第 3 d、第 6 d、第 9 d、第 12 d
分别下降 %(P <)、%(P <)、%(P <)、%(P <);
MT+ACR 组于第 6 d、第 9 d、第 12 d 分别下降 %(P <)、%(P <)、
%(P <)。与 ACR 组相比,MT+ACR 组于第 9 d、第 12 d 分别增长 %
(P <)、%(P <)。(2)在第 3~12 d,ACR 组和 MT+ACR 组的步态
分值明显高于对照组(P <)。与 ACR 组相比,第 6 d,MT+ACR 组的步态减
轻 % (P <),第 9 d 减低 20%(P <)。(3)与对照组相比,ACR 组的
甩尾时间于第 9 d,第 12 d 分别缩短 %(P <),55%(P <),MT+ACR
组的甩尾时间于第 9 d,第 12 d 分别缩短 %(P <),%(P <)。
第 12 d,与 ACR 组相比,MT+ACR 组的甩尾时间延长 %(P <)。(4) 随
着染毒时间的延长,ACR 组的后肢撑力指数呈明显的增大趋势,MT+ACR 组呈
轻微的增大趋势。与对照组相比,ACR 组从第 6 d 开始后肢撑力指数明显增大(P
<),MT+ACR 组从第 9 d 开始后