文档介绍：。研究生签名:殳速钦研究生签名:≥塞纵导师签章:舄日矽//牵宴..’.日。.,河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。研究生学位论文独创性声明本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。级学院领导盖章:本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人己发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。导师签章:一。
中英研综致个
测卿在大鼠脑组织、心脏、肾脏、肝脏、肺脏、骨骼肌、脾脏和睾丸蜃白酶。是去泛素酶家族中种类最多,结构最为复大鼠脑组织总驛,采用分段扩增的方法,运用反转录聚合酶链式反应泛素特异性蛋白酶姆肿涌寺『捅泶要目的:蛋白质的泛素化修饰是细胞内的一种基本调控机制,参与调控细胞循环,薷矗藕抛5己妥B蓟罨榷嘀窒赴獭U庵肿录后修饰是一种动态的、可逆的过程,由多种泛素结合酶和去泛素化酶调节控制。其中去泛素化酶可以特异性的去除泛素化蛋白底物上的泛素分子,从而调控细胞进程。去泛素化酶家族大约有个成员,按结构和功能分为五种类型,包括泛素羧基末端水解酶,泛素特异性蛋白酶,含甁峁褂虻牡鞍酌殉仓琢龅鞍酌杂的一类,人类有种,它们的氨基酸序列都含有高度保守的结构域:琀和疉结构域。本课题所研究的泛素特异性蛋白酶对于墓δ芑钚院妥橹植嫉榷蓟姑挥邢昃〉┫赴陁基因的克隆,⑷シ核鼗讣觳馓逑担扒蠹测シ核鼗钚缘淖罴逊椒ǎ=徊窖芯縐的活性和生物学功能奠定基础。方法:擞梅肿涌寺〉姆椒ǹ寺基因。采用裂解法提取分别扩增获得蛈—=玼基因’分别克载体,通过蓝白斑筛选实验确定阳性克隆并应用碱裂解法提取质粒,进行双酶切鉴定及测序分析。捎糜ü舛縋甌出喽远糠椒ḿ中的相对表达水平。以蜃魑D诓危ū瓯炯銻的质量和逆转录效率的差异进行标准化。以谀宰橹械谋泶锼阶魑PW佳中文摘要摘和属于家族,但隆至..
本,比较各组织泶锼降牟钜臁融合蛋白的表达首先将’基因克隆至..#—’质粒中,!T诖蟪Ω司鶧中表达,获得诤系鞍祝奔觳馊诤系鞍目扇苄浴菇街秩シ核鼗富钚约觳馓逑担觳獯笫骍去泛素化酶活性。①.疓椒ú捎枚ㄏ蚩寺〉姆椒ü菇╬..柿#杀泶锎蠺昵┑腡甎蛋白。,经诱导后共表达,研究去泛素化酶的活性。以甎鑫1准底物,,进行%甈缬炯觳狻";疊惺芴赴璉盏己共表达,。以魑Q粜远哉眨用焱庥ü馍璩上裣低辰蟹治觥擞梅肿涌寺〉姆椒ù尤死郥食管癌细胞株中克隆因,采用去泛素化酶活性检测系统检测人类シ核鼗富钚浴结果:究翁獯哟笫竽宰橹谐晒寺〕龇核靥匾煨缘鞍酌竨基因。大鼠虻谋嗦肭,黾罨槌桑嗦个氨基酸,推测其相对分子质量约为包含高度保守的结构域:虯区域,符合泛素特异性蛋白酶的特征。在大鼠脑组织、心脏、肾脏、肝脏、肺脏、骨骼肌、脾脏和睾丸中均有表达,其中肺脏和肾脏中的表达量略高于脑组织中的表达量,;心脏、肝脏和脾脏中表达水平与脑组织相近,≈表达较少,。泶锍鯣融合蛋白。
:枞】杆菌璉盏迹鱿忠恢址肿恿吭嘉符,并且。盏时该融合蛋白为不溶性蛋白,在℃经诱导小时,甎融合蛋白部分可以溶解。⒘街秩シ核鼗富钚约觳馓逑担梢猿晒觳獾阶魑Q粜对照的娜シ核鼗富钚裕部梢约觳獾経和特异性底物的表达,但对于检测娜シ核鼗富钚裕街痔逑稻焕硐搿尤死郥食管癌细胞株中克隆颍死鄒的编码区由个碱基组成,编码霭被幔撇馄湎喽苑肿又柿吭嘉2⑶伊街秩シ核鼗富钚约觳馓逑刀杂诩觳馊死郩的去泛素化酶活性同样未得到理想结果。结论:寺〕龃笫蠓核靥匾煨缘鞍酌竨基因在大鼠各组织中均有表达,其中以肺脏和肾脏为最高。⒘肆街秩シ核鼗富钚约觳馓逑担街址椒ㄎ茨芗觳尤死郥食管癌细胞株中克隆出关键词:泛素特异性蛋白酶;环肿涌寺。换虮泶铮蛔橹中文摘要男碌鞍妆泶铮分子量为和分子量约为的理论分子量相娜シ核鼗富钚浴分布:
猚英文摘要,瑃狫,疉甒,:珼—,.,琀,.瑆,琭,—’
賂甎:贕—疷一—猤英文摘要—琣··狹——猤狹—猤,,’一—’瑃瑄—痯,.: