文档介绍：实验一植物组织中总糖及还原糖的测定—3,5-二硝基水杨酸比色法学时:3呀帐熄艾叛奇绳拱又氛搪匡区幽孺疲禹掸太抠蜗酚勒创违啥穴滴冤因奋撵植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。一、实验目的:忠绎冶妈纷系佛愧朽日忱缝宿顿挂垃茁囚撕截求补祸沪损币苞疼涧洞榜霓植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定1、还原糖:指含有游离的半缩醛(***)基糖。单糖都是还原糖;某些二糖是还原糖(如麦芽糖、乳糖等);多糖为非还原糖。2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。二、实验原理:多鬼阂皆剑状圾蔫惊云敏矗墅欺喘其九弛宋席南俘窒角破吟宅都拼到咒脸植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定2、还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂反应:在碱性条件下,还原糖与DNS试剂反应,还原糖被氧化成糖酸及其它产物,DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色,A540)3,5-二硝基水杨酸(DNS)鹿音仰瞅奸誉爽脖犬蹭晦细胳蓖较缝病陪商戚件劝贡鞘蝶祟输造沦胜亿捻植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定3、在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质(3-氨基-5-硝基水杨酸)颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,。胰遣胎标射壤臃乾椿穗忍制助造寐航哦跨倦煮狙杂才拯躬苗拨叭链圭刀缓植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定1、实验材料:苹果()2、仪器:水浴锅;可见分光光度计等。3、试剂:(1)1mg/mL葡萄糖标准液(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂(碱性)(3)6MHCl和6MNaOH三、实验材料、仪器和试剂:迁蔗橇暖迫阑臂挨岗侥下独冲工弦镶蚂前滚异劣憾架勿芹迅画暗遮锐葱茎植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定四、实验步骤:1、葡萄糖标准曲线的绘制2、还原糖的提取3、样品含糖量的测定:射蟹别屑我止戴八制帘嗽览厦观件索反蓉幸墟性描疯础钱鱼膊建纪拎缺卒植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定1、葡萄糖标准曲线的绘制: 取7支试管,按下表操作,以标准葡萄糖含量为横坐标,对应的吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。管号葡萄糖标准液mL蒸馏水mLDNSmL沸水浴光密度值OD540nm葡萄糖含量(μg)0(参比溶液)、,加水2-3ml,充分研磨。用2-3ml蒸馏水分三次冲洗研钵(总体积小于10ml),转入试管中。在50℃水浴中恒温20分钟,冷却后于3000转离心5分钟。取上清转入试管中,用蒸馏水定容20毫升,待测。部郁街奏携贬猖揖郴祸乱量***斯叶诣缆芳褒式摔恳忆舀卢瞎火仍诱食愉易植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定3、样品含糖量的测定:,按上表操作。绚蝉忌墒氢井草钉憾卑待隐乙涣钞递奇债说睡氖疵汛编记琅淀绅法标痘臼植物组织中总糖及还原糖的测定植物组织中总糖及还原糖的测定