实验四 肉制品中亚硝酸盐含量的测定.doc

文档介绍：——重氮化偶合比色法实验目的掌握肉制品中亚***盐含量的测定方法和卫生评定。二、实验原理亚***盐在酸性溶液中与格氏试剂中的对氨基苯磺酸重氮化作用,生成的重氮化合物与α—萘***发生偶合反应,生成紫红色的偶氮化合物。颜色的深浅与亚***盐含量成正比,故可以其显色度与已知量的亚***盐标准溶液比较定量。三、器材与试剂分光光度计、纳氏比色管;饱和升***溶液;格氏试剂;亚***盐标准使用液(2μg/mL);盐酸四、操作方法1、,置于250mL烧杯中,加100mL水,混匀,加热至约80℃,移入250mL容量瓶中,用水数次洗涤烧杯,洗液注入容量瓶中,加水至容量瓶的2/3容积,置沸水浴中加热1h,不时振摇,然后加5mL饱和升***溶液,冷却,再加水至刻度,混匀,过滤,滤液备用。2、测定取6支清洁干燥的50mL纳氏比色管,编号后5个标准管中分别加入0、1、2、3、4mL亚***钠标准使用液(相当于0、2、4、6、8μg亚***钠),样品管中加入5mL上述滤液,各管均加水至50mL刻度处混匀。然后分别加入2滴盐酸溶液和2mL格氏试剂,混匀,37℃加热20min,用1㎝石英比色杯,以零管调节零点,于波长525nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。编号成分标准管样品管0123452μg/mL亚***盐标准使用液(mL)01234/样品滤液(mL)/////5相当于亚***盐含量(μg/mL)02468A1(加水至50mL刻度处,混匀)盐酸(滴)222222格氏试剂(mL)222222(混匀,37℃水浴加热20min)吸光度(OD525nm)03、计算式中:X1——样品中亚***盐含量(mg/㎏);m1——样品质量(g);A1——从标准曲线测得样液中亚***盐含量(μg);V1——样品处理滤液总体积(mL);V2——测定时取用样品滤液体积(mL)。4、判定标准香肠(腊肠)、香肚、广式腊肉、火腿≤20mg/kg肉灌肠、肴肉、咸猪肉≤30mg/kg腌腊肉制品罐头(包括午餐肉、咸牛肉、咸羊肉、火腿猪肉、猪肉香肠等)≤50mg/kg西式蒸煮、烟熏火腿、西式火腿罐头≤70mg/kg五、结果分析与讨论数据结果(吸光度值)制作标准曲线计算样品中亚***钠含量综合判定