文档介绍：:规范不同检材的DNA提取操作程序,确保DNA质量,保证STR分型结果准确性。:Chelex-100是一种由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成的化学螯合树脂,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,可螯合多价离子,特别是对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。在低离子强度、碱性及煮沸的条件下,可以使细胞膜破裂,并使蛋白质变性,通过离心除去Chelex颗粒,使其结合的物质与DNA分离。磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。:具有法医物证检验资格的广西区妇幼司法鉴定所技术人员。:5%EDTA抗凝全血、8-10ml胎儿羊水、5%EDTA抗凝脐血、FTA纸血斑、口腔拭子、5-10根带毛囊的毛发、绒毛细胞。5试剂::-100伯乐公司(Bio-RadLaboratories,)。。(G&T,)。:%Chelex-100的配制:称取5克粉状Chelex-100于试剂瓶中,加入灭过菌的超纯水至100ml。:用干净的试剂瓶装超纯水1升左右,经121℃灭菌30分。6仪器及设备:。。。,单道微量移液器(-10ul单道)、单道微量移液器(10-100ul单道)、单道微量移液器(100-1000ul单道)、八道移液器(-10ul八道)和八道移液器(10-100ul八道)。。。。7操作程序:(Chelex-100法)“PCR-STR基因扩增实验记录表”。-,加无菌超纯水980ul。,用移液器混匀,(-80℃存放超过一个月的血样取2-)。,,弃上清,剩余沉淀约20ul。,颠倒混匀,,弃上清,剩余沉淀约20ul。%Chelex-100溶液200ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5%Chelex-100),盖紧EP管,振荡约15~20sec后,56℃~2h。~20sec,99℃孵浴8min。(Chelex-100法)“PCR-STR基因扩增实验记录表”。-,加无菌超纯水700ml。,用移液器混匀,吸取300ml于EP管中。,,弃上清,剩余沉淀约20ul。,颠倒混匀,,弃上清,剩余沉淀约20ul。%Chelex-100溶液200ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5%Chelex-100),盖紧EP管,振荡约15~20sec后,56℃~2h。~20sec,99℃孵浴8min。~20sec,,上清即为DNA溶液。(Chelex-100法)“PCR-STR基因扩增实验记录表”。-,加无菌超纯水980ul。,用移液器混匀,(-80℃存放超过一个月的血样取2-)。,,弃上清,剩余沉淀约20ul。,颠倒混匀,,弃上清,剩余沉淀约20ul。%Chelex-100溶液200ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5