文档介绍：COX2在Barrett食管中的表达及意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【摘要】目的: 探讨环氧合酶2(COX2)在Barrett食管(BE)中的表达及意义。方法: 用免疫组织化学二步法染色检测COX2在BE、慢性食管炎及正常食管黏膜中的表达。结果: 免疫组织化学染色显示COX2主要在表层上皮细胞及化生的腺上皮细胞胞浆中表达,COX2在BE和慢性食管炎中的表达较正常食管黏膜显著增高(P<),而在前两组组织中的差异无统计学意义(P>)。结论: COX2可能参与慢性食管炎和BE的发生发展过程,并有可能促进BE向食管腺癌发展。
【关键词】氧合酶类 Barrett食管食管炎
Barrett食管(Barrett esophagus,BE)是指食管下段的复层鳞状上皮被化生的单层柱状上皮所替代的一种病理现象,可伴有肠化或无肠化,而特殊肠上皮化生属于食管腺癌的癌前病变。环氧合酶(COX)是花生四烯酸转化为前列腺素(PG)过程中的关键限速酶,研究表明,COX2参与人类多种肿瘤,尤其是消化道肿瘤的发生和发展。因此,实验检测COX2在BE及慢性食管炎中的表达情况,以探讨COX
2在BE发病中的作用,为BE的防治提供一定的依据。
1 材料与方法
材料 BE组30例,经胃镜和病理活检证实,年龄29~67岁(平均45岁),其中男性18例(平均43岁),女性12例(平均47岁)。对照组为BE病变边缘5 cm以远食管正常黏膜或慢性食管炎。BE诊断标准: (1)胃镜下见到在胃食管结合处的近端出现岛型、舌型或环周型橘红色柱状上皮,在怀疑为Barrett上皮部位均取1~2块组织,经指定的病理医师证实为BE黏膜改变,镜下见化生的柱状上皮或肠上皮;(2)除外食管癌患者。
方法采用非生物素二步法免疫组织化学染色。石蜡切片脱蜡水化,3%H2O2去离子水孵育10 min,阻断内源性过氧化物酶,高压抗原修复。滴加I抗:兔抗人COX2多克隆抗体(1∶120,美国Neomarker公司),4 ℃过夜, mol/L PBS代替I抗作为阴性对照;滴加II抗:山羊抗兔IgG抗体-HRP多聚体(PV6001),37 ℃孵育30 min;DAB显色, 阳性显色为棕黄色或褐色;二甲苯透明,中性树胶封片。
结果判定用Biomias2001图像分析系统处理,细胞内出现棕黄色或褐色颗粒为阳性。随机选取5个高倍视野(×400)计数阳性细胞百分率,依阳性细胞百分率判定阳性强度。阴性(-)染色细胞数为0,弱阳性(+)染色细胞数为1%~25%,阳性(++)染色细胞数为26%~50%,强阳性(+++)染色细胞数>51%。表达“+”者计入低表达组,“++”或“+++”者计入高表达组。
统计学处理实验数据用SPSS ,采用
χ2检验及Fisher确切概率法,P<。
2 结果
COX2蛋白主要在表层上皮细胞及化生的腺上皮细胞胞浆中,呈棕黄色染色(图1,2)。COX2在BE和慢性食管炎组织中的表达阳性率较正常食管组织明显增高(P<),但在前两类组织中COX2的表达差异无统计学意义(P>