文档介绍：维药异常黑胆质成熟剂总黄酮对Bel/Fu细胞株多药耐药性及mRNA表达的影响
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:玛依努尔·艾力,哈木拉提·吾甫尔,阿不力孜,伊力哈木
【摘要】目的研究异常黑胆质成熟剂总黄酮对肝癌Bel/Fu细胞株多药耐药性(MDR)及mRNA表达的影响。方法逆转录聚合酶链式反应法检测细胞内MDR1、MRP、GST-π、TopoⅡα mRNA的表达。结果异常黑胆质成熟剂总黄酮可抑制人肝癌Bel/Fu细胞株MDR1 mRNA的表达,提高TopoⅡαmRNA水平。结论异常黑胆质成熟剂总黄酮抑制MDR1 mRNA的表达、提高TopoⅡαmRNA水平是其逆转肝癌MDR的机制。
【关键词】维药;Bel/Fu细胞株;多药耐药性;逆转录聚合酶链式反应法;异常黑胆质成熟剂总黄酮
Abstract:Objective To study the effect of Abnormal Savda Munziq (ASMq) on MDR and expression of mRNA of Bel/Fu cell line. Methods Several genes expression including MDR1, MRP, TOPOII
α and GST-π were analyzed by RT-PCR. Results ASMq has been found to down-regulate MDR1 gene and simultaneously up-regulate TopoⅡαmRNA. Conclusion ASMq can reverse the drug resistance against 5-Fu in Bel/Fu cells. Inhibition of MDR1 mRNA and up-regulate TopoⅡα mRNA may contribute to the mechanisms.
Key words:Uighur medicine;Bel/Fu cell line;MDR;RT-PCR;ASMq
本实验选用肝癌耐药细胞株Bel/Fu作为研究对象,对维药异常黑胆质成熟剂总黄酮(ASMq)逆转肝癌多药耐药性(MDR)与相关分子机制进行了研究,旨在寻找一种新型具有MDR逆转作用的药物。
1 实验材料
9700型PCR扩增仪;Kodak凝胶电泳成像分析系统(EDAS);肝癌细胞株Bel/Fu(南京凯基生物公司产品);ASMq,新疆维吾尔医研究所提供;5-氟尿嘧啶(5-Fu),扬州奥赛康药业有限公司产品;逆转录酶AMV(Gibco/BRL公司);Tripure试剂(Gibco/BRL公司);Taq酶(宝泰克公司);特异性引物(Takara公司合成)。
2 实验方法
MTT法测定细胞毒
%胰酶消化处理对数生长期细胞,用含质量分数为10%胎牛血清的RPMI-1640培养液配成密度为3
×103个细胞/mL单细胞悬液,接种于96孔培养板中,每孔体积200 μL,待细胞贴壁后,分成5组。ASMq组加5 μL ASMq,其浓度为300、320、340、350、360、380、3