文档介绍：MMP2和VEGF在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义
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【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP2)及血管内皮生长因子(VEGF)在软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测MMP2和VEGF在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织各20例中的表达,并分析其与年龄、性别和复发、转移等因素的关系。结果 VEGF和MMP2在骨巨细胞瘤和骨肉瘤组的阳性表达率(60%,70%;90%,80%)明显高于软骨瘤组(25%,30%)(,),且两者的表达有显著正相关性()。MMP2和VEGF的阳性表达与复发和转移显著相关(,),与年龄和性别无关。结论 MMP2和VEGF可作为骨巨细胞瘤和骨肉瘤的预后指标。
【关键词】基质金属蛋白酶2;血管内皮生长因子;骨软骨瘤;骨巨细胞瘤;骨肉瘤
近年的研究表明〔1,2〕,基质金属蛋白酶(MMP)和血管内皮生长因子(VEGF)与恶性肿瘤的侵袭及转移关系密切。已有报道VEGF和MMP
2在骨肿瘤中存在高表达,而且与转移和复发关系密切〔3,4〕,但尚未见联合检测MMP2和VEGF在骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达及临床意义的报道。本实验拟采用免疫组化法,联合检测VEGF和MMP2在软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤组织中的表达,并分析其与年龄、性别和复发、转移之间的关系,比较两者之间的差异及相关性。
1 材料与方法
临床资料骨软骨瘤、骨巨细胞瘤和骨肉瘤各20例患者均为2003年7月至2008年7月辽宁医学院附属第一医院骨科住院病人,术前均未行放疗和化疗,术后标本经病理证实诊断,术后常规治疗并定期复查,随访12~60个月,平均36个月。骨巨细胞瘤患者20例,男5例,女15例,年龄14~57岁,平均(±)岁;发病部位:股骨8例,胫骨4例,桡骨4例,腓骨3例,骶骨1例;术后复发8例,转移9例。骨肉瘤患者20例,男14例,女6例,年龄8~56岁,平均(±)岁;发病部位:股骨8例,胫骨8例,肱骨4例;术后复发16例,转移17例。软骨瘤患者20例,男8例,女12例,年龄4~62岁,平均(±)岁;发病部位:股骨8例,胫骨6例,肱骨2例,肋骨2例,肩胛骨1例,踝骨1例,术后无复发及转移。
免疫组织化学染色(SABC法) 术后组织立即用中性福尔马林固定,自动脱水,浸蜡,包埋。石蜡标本连续切片4张,4 μm 厚,1张HE染色,1张PBS代替一抗阴性对照。AntiMMP2和Anti
VEGF兔抗人多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗购自Santa Cruz公司,SABC组化试剂盒购自武汉博士德公司。按照试剂盒说明操作。
结果判断光学显微镜下观察蛋白表达情况,照相。阳性结果为细胞胞浆或胞膜棕黄着色,随机选取5个高倍镜视野,计数方法采用HPIAS1000高清晰度彩色病理图文分析系统,按阳性细胞所占比例分为(-):瘤细胞染色阴性或 5% 的瘤细胞有少量着色;(+):5%~20%的瘤细胞呈弱阳性;():21%~50% 的瘤细胞阳性;():