文档介绍：X连锁凋亡抑制蛋白在子宫颈癌组织的表达
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:夏春波周思蒋常文刘健翔何丽霞兰羚元
【摘要】目的探讨XIAPmRNA表达在子宫颈癌发生发展过程中的作用。方法通过HE染色从组织病理学上确定子宫颈组织的良、恶性以及恶性组织的分级和分期。应用RTPCR法检测43例子宫颈癌组织和15例慢性子宫颈炎组织中XIAP mRNA的表达情况。%,明显高于慢性子宫颈炎组织(%),两者差异显著()。 XIAPmRNA表达随分化程度降低而升高(),有淋巴转移的患者高于无淋巴转移的患者();子宫颈癌组织XIAP mRNA表达与患者年龄、病理分期无关()。结论 XIAP与子宫颈癌发生发展有密切关系;其表达水平的检测对子宫颈癌的病理诊断及其分级有参考价值。
【关键词】子宫颈癌;XIAP基因;RTPCR
X连锁凋亡抑制蛋白(Xlinked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)是最有效力的caspase抑制物之一,可通过多种途径介导细胞凋亡,近年来发现XIAP蛋白在多种肿瘤中高表达,与肿瘤的分化程度及预后有关,已成为肿瘤基因治疗的新靶点和研究热点〔1,2〕。为此,本实验采用RT
PCR法检测子宫颈癌组织和慢性子宫颈炎组织中XIAPmRNA表达情况,以探讨XIAP基因在子宫颈癌发生发展中的作用。
1 材料与方法
标本来源标本来自2006年3月~2007年11月桂林医学院附属医院妇产科门诊,资料收集均取得患者同意, cm× cm× cm。43例子宫颈癌组织均未行化疗或放疗,包括子宫颈癌G1级11例、G2级23例、G3级9例。临床分期:Ⅰ期6例,Ⅱ期7例,Ⅲ期16例,Ⅳ期14例。有淋巴转移的13例,无淋巴转移的30例。年龄30~61(平均48)岁,其中50岁以上19例,50岁以下24例。另外取慢性子宫颈炎组织15例作为对照。所有标本均经HE染色证实诊断。标本获取后立即放置到液氮容器内暂时保存,之后转移到-80℃低温冰箱中保存。
主要试剂 Trizol试剂购自Invitrogen公司,Random Primers及RTPCR Kit(K1003S)均购自Promega公司。引物根据NCBI基因库中提供的XIAP(U45880)、βactin(AY582799)cDNA序列,采用引物分析软件Primer Premier 、βactin基因序列上设计引物。XIAP上游引物5′GGT GAT AAA GTA AAG TGC TTT CAC TGT3′,下游引物5′TCA GTA GTT CTT ACC AGA CAC TCC TCA A3′,产物为188 bp;βactin上游引物5′CAC CAA CTG GGA CGA CA3′,下游引物5′GCA AAG AAC ACG GCT AA
3′,产物为498 bp。βactin、XIAP引物均由北京赛百盛基因公司合成。
方法
HE染色标本经常规固定、脱水、透明