冠心病患者冬眠心肌中TNF-α表达及细胞凋亡的临床研究.doc

文档介绍：冠心病患者冬眠心肌中TNF-α表达及细胞凋亡的临床研究
作者:李东野钱文浩於江泉夏勇潘德锋孙全胜张中明
【摘要】目的探讨冬眠心肌细胞内TNF-α mRNA与心肌细胞凋亡的变化和意义,初步探索冬眠心肌形成的分子生物学机制。方法行冠状动脉搭桥手术(CABG)的冠心病患者10例,术前1周内用多巴酚丁胺超声负荷试验(DSE)结合多普勒组织成像(DTI)确定冬眠心肌及正常心肌的存在部位,CABG术中根据检测结果进行取材(分别取正常心肌和冬眠心肌),并经电镜证实。取材心肌用 Tunel法检测心肌细胞凋亡情况,原位杂交法(ISH)测定TNF-α mRNA的活性。分析TNF-α mRNA与心肌细胞凋亡的关系。结果冬眠心肌细胞凋亡数及TNF-α mRNA的表达较正常细胞高;TNF-α mRNA与冬眠心肌细胞凋亡数相关(r=,P<)。结论心肌缺血缺氧时,心肌细胞内TNF-α分泌增加,TNF-α促进冬眠心肌的形成并诱导心肌细胞凋亡。
【关键词】冬眠心肌;肿瘤坏死因子α;分子生物学机制
心肌冬眠(hibernating myocardium,HM)是心脏自动适应心肌慢性低灌注的一种反应,此时心肌灌注和心肌功能之间达到一种新的平衡。HM已成为近年来冠心病研究领域的热点之一,但迄今HM形成的确切机制尚不完全清楚。有研究发现,HM局部收缩功能与肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)高表达呈负相关[1],TNF-а的高表达可以促进动物心肌细胞凋亡。TNF-
α的表达与冠心病患者HM凋亡之间的关系鲜见报道。本研究观察冠心病患者HM细胞的TNF-α mRNA表达,同时观察HM细胞凋亡情况。
1 材料和方法
实验材料 TNF-α mRNA原位杂交试剂盒、细胞凋亡试剂盒均购自武汉博士德生物公司。冠心病患者的心肌标本由徐州医学院附属医院胸心外科协助取材。
心肌标本来源 10例心肌标本均来自2004年8月—2006年3月在我院胸心外科行冠状动脉搭桥手术(CABG)的冠心病患者,冠状动脉造影至少有1支冠状动脉狭窄程度大于85%。男性7例,女性3例,平均年龄(±)岁。术中取HM及正常心肌(normal myocardium,NM)。
HM定位
采用多巴酚丁胺超声负荷试验(DSE)结合组织多普勒成像(DTI)技术。将左心室按美国超声心动图协会方法分为相对应的16个节段。
DSE检查方案试验分为静息、多巴酚丁胺10 μg/(kg·min)、30 μg/(kg·min) 3个级别,每级负荷维持5 min,于每级负荷时记录超声图像,并记录常规12导联ECG和血压;终止指标为:出现心绞痛;收缩压<80 mmHg或≥ 220 mmHg(1 mmHg= kPa);出现严重心律失常;心率达到该患者年龄估算最高心率的85%;同一节段运动出现双相反应。
室壁节段运动异常的判定 DTI测量心肌收缩期峰值平均运动速度。如静息时平均运动速度低于正常速度,负荷10 μg/(kg·min) 多巴酚丁胺时心肌运动速度较静息时明显增高,负荷30 μg/(kg·min) 多巴酚丁胺时心肌运动速度反而减低,此时定义心肌运动呈双相反应,判定为HM。