文档介绍：霄裙./、年亨月矽日河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明成果,指导教师对此进行了审定。小论义由本人独立撰:写,文责自负。砂壕可┟本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导卜.,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权河北缚拼笱有。河:耙娇拼笱в腥ǘ员狙宦畚慕薪涣鳌⒐ǹ:褪褂谩7卜捉与学位沦文主要内容相关的沦文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、ǖ淖ɡ戎J恫ň河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。研究生签名:导帅签章:本论文是在导帅指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了义一乇鸺右员曜⒌饶谌萃猓闹械包含其他人已发表或撰写的研究导师签章:
综述船靥宓难芯拷埂录目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究论文复制型乙型肝炎病毒载体及自主复制细胞系的构建引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分携带外源基因的复制型靥宓墓菇前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二部分携带筛选标志的复制型糜诠菇℉自主复制细胞系的研究材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·刚舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
琕8靶向性基因治疗的载体。耶弑父脑熳魑0邢蛐曰蛑瘟圃靥宓幕条件,但因自身基因结构复杂,限制了皿靥宓母脑臁D壳按琕载了其分子生物学特性,并利用复制型皿靥逵胂俨《驹靥辶:喜呗裕探讨了携带筛选标记的复制型船靥逵糜诠菇ù琕自主复制细胞模目的:把船脑煳1泶锿庠椿虻母粗菩痛琕载体,分析其复帽泶镆吧挖齎的质粒/及小,构建复制型体存在的问题是载容量小、复制能力低等缺陷,并且皿靥逯票咐选用解决这一难题。本课题优化舳靥甯脑觳呗裕汛琕的核心蛋白表达外源基因和鞍祝菇诵庠椿虻母粗菩兔骎载体,分析、脑炎心肌炎病毒鰅鰎,个复制型乙型肝炎病毒载体及其自主复制细胞系的构建的内部核糖体进入位点舶要近年来有学者提出改造乙型肝炎病毒感染效率低,有必要与其他载体如腺病毒载体、逆转录病毒载体等联合应攵嗑勖富重叠区域分开,在之间利用鼋型的可行性。本研究共分糠滞瓿伞第一部分携带外源基因的复制型靥宓墓菇制特性及对抗病毒药物的敏感性。τ没蛑刈榧际酰菇巳缦个质粒:...瓻7直鹩小表达增强型蓝绿色荧光蛋白锄觚珽。利用脂质体分别转染肝癌细胞ü显微镜观察绿色荧光的表达情况,以测试两个韒1载体质粒:以/为母质粒,把核心蛋白攵嗑勖富重叠区域分开,在之间利用鼋的短小,分别表达外源基因和鞍祝诘谝桓鯥臩后插入外源基因。我们构建了表达杀稻中文摘要摘,直方法:串联的达的效率。
瘟菌素抗性基因达基因的质粒畆印.、,提取细胞培养液和细胞裂解液中的琒觳猓鄄炱涠收集细胞培养上清液,聚乙二醇毒,感染细胞,旌笥ü庀晕⒕倒鄄旄粗菩筒《綡术载体的狙芯抗菇个不同类型的质粒,观察迮舳疎氲男剩的垣氤S玫腅泶镄氏嗨疲个小汪1泶种外源基因时,其后端的表达稍弱,但可见其表达。证明在同一上,利用鯥臩,可串联表达龌颉9鄄旄粗菩虷载体的复制能力及对插入序列长度的容忍性,通过9鄄旄粗菩虷载体对夷さ鞍资欠裼杏跋欤ü齏检测,证实所构建的上述粗圃靥宥訮、蚐结构蛋白的9鄄旄粗菩虸靥遄魑狧复制模型的可行性,⑾掷追蚨ǹ梢种艸的复制,并呈剂量依赖性。,、表粗菩虷载体分子生物学特性的观察:上述柿R员泶镆吧检测表达。检测峁沟鞍椎谋泶、。将质粒猺—H局罤细胞后,经常用的核苷类似物拉米夫定的敏感性。。结果:通过观察的表达,发现小启动翻译的效率明显高于约晒菇怂尽孕嘀滞庠椿虻母粗菩虷载体质粒畆、猺—皃—瓻盖屑安庑蚣ǎ肜砺凵杓葡嗤检测,发现当表达的时,其复制能力与野生型啾龋杂邢陆担辈迦的时,复制能力明显降低,但仍有较高的复制水平。表达无