文档介绍：:..化学发光免疫分析翻译化学发光免疫分析姓名:学号:113138301专业:坏境科学学院:坏境科学与安全T程学院2009年第4号第28卷,分析化学的趋势化学发光免疫分析赵丽霞,孙俪,褚晓刚化学发光免疫分析(CLIA)有几种潜在的优势,并且已经在临床医学、生物分析和坏境分析中应用。木文涵盖了CILIA在免疫学、CL标记及相关技术和固相材料中的应用和最新的进展。我们描述了CLTA的白动化、集成及小型化。。关键词:生物分析,化学发光免疫分析,化学发光标记,环境分析,免疫学,标记,制药分析,(IA)具有高灵放度、高选择性、快速检测和不用广泛的治愈就能分析怵I难的矩阵等优点,因而被广泛应用丁-制药分析、毒物分析、生物分析、临床医学和环境分析中。1959年,雅洛和博森[1]用1251作为标记元素,继而放射免疫法(RTA)被发明。虽然RIA方法可靠并精确,但是这种方法在放射性同位索方而的应用还不是很好,放射性同位素限制这种方法必须施川专门的标记物。并且1251的半衰期较短[2,3],这也限制了放射免疫法的普及。酶联免疫分析方法(ELISAs)比RIA更安全、更容易,因而应用比较广泛。ELISA是以比色、荧光和化学发光(CL)检测为基础的检测方法。然而,传统的比色法检测的灵敏度相对较低[4]。IA具有非常高的检测灵敏度[5,6],因而被应用于检测方法屮,这种方法依靠的是特界性抗体(Abs)的亲和力和检测方法的灵敏度。在检测方法中,CL检测方法足在生物技术领域应用范围较广的一个多功能的、超灵敏的丁具。CL方法替代了放射性的方法,-与IA的检测原理和结合用于检测分子(如蛋白质、激素、药物、核酸和环境污染物等)。现在,CI,经常以一个CL标记物的形式或以一种酶或纳米粒子(NP)的检测反应的形式用于]A方法中。近年來,由于CLIA具有高灵敏度、宽的动态范I韦I和完幣的自动化等优点,已被广泛的应用于临床医学和环境分析中。随着重组抗体&Ab)技术、标记和相关技术、固相材料、自动化的技术改进、集成化和小型化技术的应用和发展,CIJA已经获得一个全新的改观。,多克隆和单克隆Abs(pAbs和mAbs)-<H主导着IA,并且以后也会继续[7]。传统上,Abs可以从超免疫动物和杂交瘤细胞屮获得。迄今为止,表1展示了rAbs在很多动物体内提取(如兔了、羊、鸡和牛),这种提取方法相对比较便宜且提取量比较大,但是这种捉取方法会掺杂着结构和似的化合物和共存污染物,共存污染物用于分析以pAb为基础的检测基质效应。虽然mAbs通常由小鼠体内捉取[8],但是它们拥有特异性结合的特点,并11是基于电克隆抗体的检测,比基于pAb为基础的检测更为做感。生产单克隆抗体的主要缺点是它们很昂贵并几产生和维持-个杂交瘤细胞株[9]要求的技术水平比较高。动物的免疫反应可以预先确定单克隆抗体的结介特性并且在蛋白质水平上很难修改[10]。然而,由于表达抗体片段的分子方法和生产及筛选组合库技术的发展,冃前己经开辟了一个比较宽的用于选杼和设计rAbs的机会[11]。rAbs不需要结合骨髓瘤细胞就可以从各种动物体内提取。从动物体内提取的抗体基因能够通过聚合酶链反应(PCR)而扩增,并能以各种形式在不同的表达系统中被表达。[例如:片段,抗原结合(Fab),片段,变量区域(Fv),单链Fv(scFv)和单域的重链可变区片段(VHH),从骆驼体内提取的重链Abs(HCAbs)]:(1) 它们的体积比较小,因此更容易操纵基因并在细菌体内表达。(2) 它们可以被表达并作为融合蛋门在噬菌体表面被(3) 显示时,它们保留亲和选择的功能。[10]因此,就生产方而來说,rAbs为传统的mAbs或pAbs提供了优势,增加了保留选择性和多功能性的优点。从人噬菌体体内提取生产和选择抗体片段已成为一个常用生产特定的Abs的方法。当Abs被用來抵抗小的,无免疫原性的分子(半抗原)或剧毒物质时,这种技术就特别的有价值。此外,半抗原经常结合蛋白质载体一起承担白由半抗原不被检出的风险。Pan等[18]利用噬菌体显示技术來生产直接抵抗[3-受体(克伦特罗)的单链抗体。噬菌体的单链抗体叮变区基因片段(scFv)通过卵清蛋门链的结合而放人。在酶联反应屮,scFv和mAb母链(IC50为1・(n=4))相比呈现出了比较高的灵敏度(±(n=4))。劳尔等[19]生产了单链抗体