文档介绍：
自噬抑制药物氯喹联合索拉菲尼抑制肝癌
细胞的实验研究#
丁振斌,史颖弘,彭远飞,宋康*
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(复旦大学附属中山医院肝癌研究所,上海,200032)
摘要:目的:研究小剂量氯喹(CQ)联合索拉菲尼(Sorafenib)的抑制肝癌细胞的效果,
并探索其机制。方法:首先应用 sorafenib 干预三种肝癌细胞 97-L、PLC/PRF/5 和
HepG2,应用 annexinV/PI 染色流式检测细胞凋亡,GFP-LC3 转染及 LC3 Western blot 技术
检测细胞自噬活性。应用自噬抑制剂 3-MA、小剂量 CQ 或 RNAi 沉默 Atg5 的表达抑制自噬
活性后,检测 sorafenib 诱导的 97-L 细胞凋亡。结果:Sorafenib 能够诱导肝癌细胞凋
亡,annexin V 阳性细胞显著增加,且具有浓度及时间依赖趋势。在 sorafenib 诱导细胞凋亡
的同时,我们发现细胞内的自噬相关蛋白 Atg5、Beclin 1 均随着时间的延长表达逐渐增加。
自噬标记性蛋白 LC3-II 在药物作用 6h 后即显著高表达。Sorafenib 干预 GFP-LC3 转染后的
细胞,6h 后即出现大量点状荧光聚集,提示自噬小泡的形成增加。而后我们发现通过 3-MA、
小剂量 CQ 或 RNAi 沉默 Atg5 的表达抑制自噬可以增强 sorafenib 诱导的细胞凋亡。结论:
CQ 通过抑制自噬的降解机制可以促进 sorafenib 诱导的肿瘤细胞凋亡,增强 sorafenib 的抑瘤
作用。自噬作为细胞的一种保护性机制,可以保护肿瘤细胞逃避药物诱导的凋亡。
关键词:关键词 1;自噬 2;肝细胞癌 3;凋亡 4;氯喹 5;索拉菲尼
中图分类号:R73-36+11
Effect of sorafenib bination with chloroquine on
preventing HCC in vivo
DING Zhenbin, SHI Yinghong, PENG Yuanfei, SONG Kang
(Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai, 200032)
Abstract: Purpose: To investigate the effect of sorafenib bination with low-dose
chloroquine (CQ) on HCC, and explore the underlying mechnism to provide a new route to
improve the effect of HCC chemotherapy. Methods: 97-L, PLC/PRF/5 and HepG2 cells
were treated with sorafenib at different concentrations and differnt time courses. The extent of cell
apoptosis was routinely assessed