文档介绍：HPLC―ELSD法测定八角茴香中莽草酸的含量[摘要]目的建立八角茴香中莽草酸含量的HPLC-ELSD测定方法。方法采用HypersilNH2柱(250mm×,5μm),乙***-水(80∶20,%甲酸)为流动相,,柱温30℃。漂移管温度100℃,。~(r=);供试品溶液在24h内稳定;%(n=6)。结论所建立的方法专属性强,精密度好,结果准确。[关键词]莽草酸;八角茴香;HPLC-ELSD法;含量测定[中图分类号]R927[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2013)03(b)-0119-02八角茴香,常绿乔木,高达20m。其聚合果含大量莽草酸,常由8个骨突果生在中轴呈星状,外表面红棕色,有不规则皱纹,顶端呈鸟喙状,上侧多开裂[1]。主产广西、广东、云南等地[2]。莽草酸是从中药八角茴香中提取的一种单体化合物,有抗炎、镇痛作用,是抗癌药物中间体。有明显抗血栓形成作用,可抑制动、静脉血栓及脑血栓形成[3]。莽草酸是世界上对付禽流感的唯一武器,莽草酸是可有效对付致命的H5N1禽流感病毒的药物“达菲”的重要成分。莽草酸(shikimicacid)为三萜酸,结构式见图1。它是有机弱酸,在水溶液中易解离。现有的HPLC分析检测方法主要有以下几种:①直接用ODS柱测定,结果发现莽草酸不经吸附就可直接出峰。为了在常规的ODS柱上延长莽草酸的保留时间,一般要加入磷酸缓冲盐溶液[4],或强酸溶液(HClO4,pH=)[5-6],或离子对试剂[7]。但是,磷酸盐缓冲液系统和强酸溶液会增加对反相色谱柱损坏的程度。②采用氨基键合相硅胶柱[8],不需要加入强酸做流动相,即可获得令人满意的分离效果。③在检测波长的选择方面,现有文献均用213nm左右的波长进行测定,但是该吸收峰接近末端吸收,易受杂质干扰。相比之下,蒸发光散射检测器(evaporativelight-scatteringdetector,ELSD)由于其独特的检测原理却可以克服紫外检测器的不足,这是因为ELSD检测器适用于分析没有紫外吸收或者只有末端吸收的成分,其响应不依赖于样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测。ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。因此,为了提高莽草酸含量测定的准确性,本文选择了氨基键合相硅胶柱和蒸发光散射检测器进行含量测定研究。1仪器与试药Agilent1100HPLC,Alltech2000型蒸发光散射检测器;色谱柱:HypersilNH2柱(250mm×,5μm),大连伊利特。莽草酸标准品(芜湖甙尔塔医药科技有限公司,纯度98%);.。乙***为色谱纯(Fisher公司),甲酸(分析纯),水为娃哈哈纯净水。,用甲醇溶于25mL量瓶中,定容至刻度,摇匀,作为莽草酸标准储备液。精密量取储备液5mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀作为莽草酸的标准品溶液,。