文档介绍：中国协和医科大学博士生论文第l页缩写词p汀PAN口bpcDNADEPCDTTEBEDTALRP~【Ⅳ喂PⅣ—-4,,5一diphenyltetmzoliumBromidemethotrexatenucleosidestrophospharesopticaldensityphOSphatebufiferedsalineployacrylamidegelelectrophoresispolymerasechainreactionP-glycoproteinresistanceindexribonucleicacidribonucleaserotatmnperminutereversetranscriptionpolymerasechainreactionsodiumdodecylsulDhatetris-oposide中文全称三磷酸腺苷氨卞青霉素碱基互补DNA焦碳酸二乙脂二硫苏糖醇溴乙锭乙二胺四乙酸肺耐药相关蛋白多药耐药基因信使RNA多药耐药相关蛋白四唑蓝甲氨喋呤三磷酸核苷混合物光密度磷酸缓冲盐溶液聚丙烯酰胺凝胶聚合酶链反应P一糖蛋白耐药指数核糖核苷RNA酶每分钟转数逆转录聚合酶链反应十二烷基硫酸钠Tris一盐缓冲液鬼臼乙叉甙生篓堕登堕兰!杰鲎竖圭生造兰墨!墨鳖瘴壁鳓辫婪的建立及耐药萎零递毽的磷究中文嫡要研究弑的:,。绒疫建发垒予生育警龄始女豹离襄瑟经瓣瘸,对纯疗敏感,是入类壤早蜀以治愈的窑体瘤之一。健仍有20%的患蠹因治疗失败藤甄亡,化疗是绒瘿的主瓣治疗方法,对纯疗药物耐受梭的产生怒治疗失败的主鞭原因。肿瘤韵耐药可l冀是先天幢匏,也可在接受他疗藤获撵,涉及多秘耐药蘩因蛉裳这,因越逆转肿瘤业已形成豹多药耐药性,悬滋一步提高绒稳疗效的有效途径。j本研究拟应/爝基邃工程技零耨绠骢翳予蒸嚣()导入已遽立懿缄癌醚嚣缀慈捷,麓察绷胞因予器因转导对绒癌细胞耐药性的逆转作用。研究蠹窭:~建立绒瘗耐蓊缨魏撩采用浓糜梯度递增法和间歇诱导的方法,用5-Fu,MTX,-3建立6个瓣药缅融株,JEG-3,蕾ul,,JEG-3RvlTXI,JEo3mrrXa,JEG-3/VPl和JEG-3/VP2,,MTX,KSM,、,(LRP,MR敢GST.#,DHFR,/、,f1)R-{)弱表达,滗较各静缨簸生长曲线,群体细胞的倍增时间,分泌13-HCG的艘异,以了解获得性耐翁的机毽。《结果{|i|药前即有LRP,MREGST-“:,DHFR的共表达,。,5-Fu采用间歇诱譬靛方法诱导形成熬醚药缨照椿MDRol表达璜强,其它瓣药基函鳃表达无致搬。用jMTX诱鼯的耐药细胞株殿用vp*16,Ⅱ,而各耐药细胞株的LRP,,DHFR的表达与诱导前相比无明显变化。用不同的药物采用不同的方法诱导的耐药细胞株,耐药基’、因的表达不同,获得性耐药机制存在差异。/二IL-2基因的转染对绒癌耐药细胞株耐药性的影响、用RT-PCR的方法克隆人的IL一2基因,(+)中,提取质粒,,,’MTX,VP一16,KSM,TAXOL耐药指数的变化,比较转染前后细胞生长曲线的变化,用流式细胞仪测定转染前后细胞DNA的含量,比较细胞周期的变化。。结曝:转染IL一2的细胞中用RT-PCR的方法检测到IL一2mRNA表达,转染前后细胞形态无明显变化,,,而其它耐药基因的表达无明显改变。。)结论:,有多种耐药基因MRP,LRP,GST一7c,DHFR的共表达,。,5-Fu采用间歇诱导的方法