文档介绍：摇摇圆园员猿允葬灶员愿怨
安徽医科大学学报粤糟贼葬哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽酝藻凿蚤糟蚤灶葬造蚤泽粤灶澡怎蚤;源愿( ) · ·
技术与方法
◇◇
责耘郧云孕鄄悦圆鄄栽砸孕酝苑重组质粒的构建及表达
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徐涛,黄成,李琳,张磊,吕雄文,李俊
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摘要从肝星状细胞( )中获得瞬时受体电位通道医科大学生物研究所沈玉先教授馈赠; 细胞
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( )蛋白的,采用和双酶切,用和感受态细胞为安徽省天然药物活性研究重
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连接酶将该连接质粒将构建成功的阅酝耘酝
责耘郧云孕鄄悦圆鄄栽砸孕酝苑孕悦砸点实验室保存。胰蛋白酶、高糖液体培养基
质粒经、限制性内切酶酶切和测序鉴匀赠糟造燥灶藻
悦韵杂鄄苑( 公司,美国);胎牛血清(杭州四季青生物
定后转染非洲绿猴肾成纤维细胞( ),荧光显微镜下观月葬皂匀陨耘糟燥砸陨云藻则鄄
孕悦砸材料研究所,中国); 、内切酶(
察绿色荧光蛋白表达, 鉴定基因表达。结果显示进行双
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酶切鉴定该质粒可见片段,转染重组质粒后可观察生物工程公司,加拿大);
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到绿色荧光蛋白的表达, 结果也可检测到基因( 公司,加拿大); 一抗( 公司,
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表达。表明成功构建重组表达裁体, 美国); 、、
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蛋白可与绿色荧光蛋白在细胞中融合表达。
摇栽砸孕酝苑悦韵杂鄄苑( 公司,美国);胶回收试剂盒、质粒提
关键词; ;基因表达粤曾赠郧藻灶远悦燥则鄄
摇砸猿源怨援远源取试剂盒( 公司,美国); 孔培养板(
中图分类号灶蚤灶早云藻则皂藻灶贼葬泽
粤员园园园原员源怨圆圆园员猿园员原园园愿怨原园缘公司,美国);反转录试剂盒( 公司,加
文献标志码文章编号( ) 蕴月鄄运葬灶葬
拿大); 琼脂培养基为本实验室配置;倒置
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瞬时受体电位( )通道是位于细胞膜上的一荧光显微镜( 公司,日本);显微数码摄影机
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类重要的阳离子通道蛋白,瞬时受体电位通道( ( 公司,日本)。
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员圆员目的基因的扩增制备根据
家族成员之一,是具有阳离子通道和蛋白激酶孕悦砸
双重结构的双功能膜蛋白,可使自身或底物磷酸化, 目的基因序列,根据引物设计原则设计特异性
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也被称为“通道酶”[ ]。参与胃癌细胞、人引物,引物序列上游引物:
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胚肾细胞( )、肝星状细胞( )等细胞的;下游引物:
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生长、增殖等多种生理过程[ ]。其广泛表达于机体, 上、