文档介绍：
大雪素叶片蛋白质提取方法的比较#
于仲艳,王文成,赵银河
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(云南农业大学农学与生物技术学院)
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摘要:本实验比较了(TCA)/丙酮沉淀法和改良的 Tris-HCl 法提取大雪素叶片蛋白质的差异以及不同方法制
备的样品对 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的影响,制备的样品经 SDS—PAGE 分离,采用考马斯
亮蓝显色。结果表明,改良的 Tris-HCl 法对大雪素蛋白质的样品制备有较好的效果,制备的大雪素样品适
用于 SDS-PAGE 分析。
关键词:大雪素;蛋白质提取;SDS-PAGE
中图分类号:Q51
Comparsion on Two Methods of Proteins Isolation from
Cymbidium tortisepalum
Yu Zhongyan, Wang Wencheng, Zhao Yinhe
(College of Agronomy and biotechnology, Yunnan Agricultural University)
Abstract: In this study, the two methods for protein extraction of trichloroacetic acid/acetone
precipitation(TCA) and modified Tris-HCl extraction leaf pared in Cymbidium
tortisepalum, meanwhile, the two different methods of protein samples prepared for
SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) was analysized. The extracts were separated
by SDS-PAGE method and followed by Coomassie blue color. The results showed that the
modified Tris-HCl extraction can be used for the sample preparation of the¬ C. tortisepalum, and
it is also suitable for SDS-PAGE analysis.
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Key words:
0 引言
Cymbidium tortisepalum;Extraction; SDS-PAGE
近年来电泳技术在植物蛋白质组学研究方面的应用越来越多的
[1-5]
,但无论哪种电泳技
术,蛋白质样品的制备都是一个先决条件。所以探索适合特定物种的蛋白质提取方法尤为重
要。大雪素叶片中蛋白质含量较低,且有色素,多糖,多酚等干扰物质,在样品制备过程中,
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增加相应的处理步骤能够有效提高蛋白质纯度,但也会随着步骤的增加而丢失一部分蛋白质
[6]
[7]
白质的提取。因而适用于大雪素叶片的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的方法尚
未建立,
本研究旨在探索一种高质量的