文档介绍:山东农业科学,:—
小立碗藓细胞色素基因
的克隆与功能分析
王凤德,叶帅“,王保,李利斌,王淑芬,朱正歌,高建伟’
.山东省农业科学院蔬菜研究所/山东省设施蔬菜生物学重点实验室/国家蔬菜改良中心山东分中心,
山东济南;.河北师范大学生命科学学院,河北石家庄
摘要:本研究克隆了一个小立碗藓基因,其全长,
预测编码个氨基酸。为了进一步研究其生物学功能,利用同源重组技术对基因实施定点突
变,成功构建了能诱导其功能缺失的载体,并获得了苔藓的功能缺失突变体。
关键词:小立碗藓;细胞色素;
中图分类号: 文献标识号: 文章编号:———
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细胞色素酶系是一类广泛分布于生物维结构具有保守性.】。例如,最保守的序列是
体内、分子量约为—、含血红素的氧化还靠近末端的一段一【一————
原酶类。到目前为止,细胞色素超家族已发—序列,其中半胱氨酸的一基团
现多个成员,分属个家族,而且不断有新可与血红素共价结合,而整个则通过末
家族、新成员被发现⋯。仅拟南芥中就有个端和内质网、线粒体、质体及高尔基体等细胞器相
家族,包括个不同的基因。尽管结合。
基因及其家族不同,但各类蛋白的三各种催化的反应广泛而复杂。包括
收稿日期:—;修回日期:—
基金项目:国家自然科学基金项目、山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目、山东省农业科学院博
士基金项目—资助。
同等第一作者:王凤德一,男,博士后,研究方向为植物分子生物学。叶帅一,男,硕士研究生,研究方向为植物分
子遗传学。
· · 通讯作者,—:.
山东农业科学芷
羟基的氧化,氮位的羟化及氧化,烷基的羟化,烯购自上海申能博彩生物科技有限公司。
基的环氧化,硫位的氧化,氧化性的碳碳键断裂及. 方法
一些还原反应等。目前,许多细胞色素基因.. 的全长编码序列的克隆
已被鉴定和克隆,并在转基因培育多抗性植物、提利用法提取小立碗藓总,采用上海
高植物降解残留化学农药等污染物的能力、创造申能博彩生物科技有限公司的反转录试剂盒反转
植物雄性不育系以及有效生产具有药用价值的化录合成第一条链。通过://
合物等方面取得可喜进展。随着对蛋白组..../公布的苔藓细胞色素
成及结构等生化特征的阐明日益全面,目前关于的库,拼接出的端和端
细胞色素的研究更多地集中在它所参与的,设计特异性引物分别为一
生物体内代谢途径及催化机制。催化的代一和
谢途径可产生一些重要的次生代谢物,使植物抵一丫一。以
抗病虫害及逆境胁迫。而且,由细胞色素小立碗藓反转录产物为模板进行扩增。
催化所合成的异黄酮类物质对人类预防癌症及心.. 基因组的克隆小立碗
血管疾病有较好作用。藓基因组提取参照和的方法。
小立碗藓是目前发现
的特异性引物同..。以小立碗藓
的唯一具有高频率同源重组特性的植物。。由
基因组为模板进行扩增。
于其具有生命周期短、易于培养、个体小、易于转.. 功能缺失载体的构建根据基因组克隆
化介导的原生质体转化、具有很强的再生
结果,找出外显子区域及内含子区域,确定打靶位