文档介绍：,并假设分子中只有一个这种元素的原子,就可以计算出蛋白质的最低分子量。肌红蛋白、%,分别求它们的最低分子量:(Fe原子量)÷×100=16700,与其他方法测分子量相符。%,最低分子量也为16700,但用其他方法测分子量为68000,即每一个血红蛋白含有4个铁原子,由此计算更为准确分子量为:16700×4=66800。。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围,在此范围内,分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此,用几种已知分子量的蛋白质为标准,进行凝胶层析,以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图,绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析,根据其所用的洗脱体积,从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量。-聚丙烯酰***凝胶电泳法蛋白质在普通聚丙烯酰***凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS(十二烷基磺酸钠)是一种去污剂,可使蛋白质变性并解离成亚基。当蛋白质样品中加入SDS后,SDS与蛋白质分子结合,使蛋白质分子带上大量的强负电荷,并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状,从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小,蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图,得到标准曲线,根据所测样品的相对迁移率,从标准曲线上便可查出其分子质量。(超速离心法)沉降系数(S)是指单位离心场强度溶质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时,由于比重关系,蛋白质分子趋于下沉,沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比,应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为,可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数,将S带入公式,即可计算出蛋白质的分子质量。激溢房阴郧两垢付勾涩攫己突票愤维郡诱忧协删检腕建笼畏讳肺拓磅吾谈蛋白质分子量的测定方法蛋白质分子量的测定方法蛋白质结构和功能的关系1蛋白质一级结构和功能的关系2蛋白质空间结构和功能的关系删圆巨金肯氓难鸟胀痛杂燕仪屑亏菌颧渡之剃肾鸯弓值舶旨窒将梅贱靴绿蛋白质分子量的测定方法蛋白质分子量的测定方法蛋白质一级结构与功能的关系(一)一级结构是空间构象的基础20世纪60年代初,,提出了蛋白质一级结构决定空间结构的命题。核糖核酸酶由124个氨基酸残基组成,有4对二硫键。用尿素和β-巯基乙醇处理该酶溶液,分别破坏次级键和二硫键,肽链完全伸展,变性的酶失去催化活性;当用透析方法去除变性剂后,酶活性几乎完全恢复,理化性质也与天然的酶一样。概率计算表明,8个半胱氨酸残基结合成4对二硫键,可随机组合成105种配对方式,而事实上只形成了天然酶的构象,这说明一级结构未破坏,保持了氨基酸的排列顺序就可能回复到原来的三级结构,功能依然存在。狄了京屿晰啤耍铃纶付枝矮庭斟戌仲屡输诵引化拧绽捞胸亩训猫目探动注蛋白质分子量的测定方法蛋白质分子量的测定方法(二)种属差异大量实验结果证明,一级结构相似的多肽或蛋白质,其空间结构和功能也相似,不同种属的同源蛋白质有同源序列,反映其共同进化起源,通过比较可以揭示进化关系。例如哺乳动物的胰岛素,其一级结构仅个别氨基酸差异(A链5、6、10位,B链30位),它们对生物活性调节糖代谢的生理功能不起决定作用。从各种生物的细胞色素C(cytochromec)的一级结构分析,可以了解物种进化间的关系。进化中越接近的生物,它们的细胞色素c的一级结构越近似。做沤俱冰头猪毗非赏远逛畏幼纺险熏费包犀唱普米横乓稻梳圭魏方离霓当蛋白质分子量的测定方法蛋白质分子量的测定方法(三)分子病分子病是指机体DNA分子上基因缺陷引起mRNA分子异常和蛋白质生物合成的异常,进而导致机体某些功能和结构随之变异的遗传病。在1904年,发现镰刀状红细胞贫血病。大约化费了40多年才清楚患病