文档介绍：取一片水稻新鲜叶片(最好为新拙出叶,长6-8cm),ⅹCTAB研磨,,盖盖,冰上放置。将研磨好的样品置于管架上,在656℃水浴30min,每隔5min摇动一次。取出管架,每支离心管加入等体积***仿,缓缓摇动10-15min。10000rpm离心5min。吸取上清液至一新离心管中,加入2倍体积预冷的95%乙醇,置于-20℃沉淀15min。12000rpm离心15min。倒掉上清液,倒立于吸水纸上凉干。加入75%乙醇400ul,浸泡沉淀5min(或10min并离心5min)。倒出上清液,将离心管风干。加入50ulTE缓冲液(1/10,)溶解DNA。置于4℃过夜,待DNA溶解后,检测DNA浓度及质量。注意事项:,如太老,酚类物质多,必须用10mM的β-ME处理。,粉末至加CTAB前不要融化。:1的***仿/异戊醇抽提时动作应轻柔,转移用的枪头最好是剪宽了的。,手套。DNA大样的提取方法(CTAB法)取8***稻新鲜叶片,切成05cm的碎片,用液氮研磨成粉末状,将叶片粉末移入一50ml离心管中,-20℃保存时间不超过24h。提取前,ⅹ的CTAB溶液预热至100℃。每管中加入20ml预热的CTAB溶液,用玻璃捧迅速搅匀,65℃水浴30min,每隔5分钟搅动一次。室温冷却溶液,注意不要低于15℃,否则CTAB会形成沉淀。每去离心管中加入20ml24:1的***仿/异戊醇溶液,盖上盖后,摇动离心管直到溶液形成乳状。室温下4000rpm离心20min,将上清液移入一新的50ml离心管中。加入1/10体积56℃预热的10%CTAB溶液,加入等体积的24:1的***仿/异戊醇溶液,缓慢摇动20min。室温下4000rpm离心20min,将上清液移入一新的50ml离心管中。加入等体积的1%CTAB溶液,轻轻混匀直到DNA纤维形成。室温下3000rpm离心10min,将DNA沉淀到离心管底部。倒置离心管于吸水纸上,将离心管风干。每管加入5ml1M的NaCl溶液和5ulRNaseA,56℃水浴除去RNA。加入10ml预冷的75%沉淀DNA,勾了DNA,在76%的乙醇沉淀中浸泡30min。将DNA沉淀转移至95%的乙醇溶液中浸泡5min。风干DNA,1mlTE()溶解DNA,4℃保存。油莎豆DNA的提取(CTAB法)——OKOLI等,1997,Biologicalcontrol1、取2—4g芽,液氮冷却并研磨至粉末2、加入15ml热的(65℃)抽提Buffer(20mMEDTA,100mMTris–HCl,,,3%CTAB(mixedalkyltrimethylammoniumbromide)(w/v),and1%(v/v)2-mercaptoethanol)3、将研磨好的样品置于管架上,