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蛋白质含量测定——双缩脲试剂法+实验报告.doc

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蛋白质含量测定——双缩脲试剂法+实验报告.doc

上传人:wxc6688 2020/1/29 文件大小:314 KB

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蛋白质含量测定——双缩脲试剂法+实验报告.doc

文档介绍

文档介绍:生物化学实验报告姓  名:   学  号:    专业年级:       组  别:  生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验日期 实验地点 合作者 指导老师 评分 教师签名 批改日期         1、、操作;;;。二、(H2N-OC-NH-CO-NH2),因分子内含有两个邻接的肽键,在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应,生成紫红色络合物。(-CO-NH-),同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应,生成的紫红色络合物,且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10~120g/L范围内有良好的线性关系。三、材料与方法:::①小牛血清;②;③双缩脲试剂:硫酸***、酒石酸钾钠、碘化钾;④蛋白质标准液(70g/L);⑤%NaCl;⑥蒸馏水。:①试管;②烧杯;③容量瓶;④加样枪;⑤刻度吸管;⑥玻璃棒;⑥1100分光光度计;⑦电子天平;⑧水浴锅。,做好标记,按下表操作:加入物(ml)     B(空白)    S(标准)    U(待测)小牛血清(1:10)     -        -        (1:10)   -                -%Nacl                -         -双缩脲试剂                      ,观察各试管颜色;℃水浴锅中加热20min,观察颜色;,置于1100分光光度计的样品槽内,在波长540nm,以空白管调零,测S和U管吸的光度;,将比色杯中的样品回收进试管。依据公式算出结果:四、结果与讨论::①选取三支洁净无损的试管,%***化钠溶液、蛋白质标准液、,分别命名为B试管、S试管和U试管,再分别向三支试管内加入4ml的双缩脲试剂,溶液均成蓝色透明状。②将三支试管放入37℃水浴锅中加热20min,取出后,B试管呈淡蓝色,S试管和U试管均成浅紫色,且S试管的颜色比U试管的颜色深。(如图一)图一水浴后三支试管颜色                                                      :代入公式:血清总蛋白(g/L)=(Au/As)X蛋白质标准液浓度(g/L),得出结果:血清总蛋白=。:正常***血清总蛋白含量为60~80g/L,而小牛血清总蛋白含量比正常***血清总蛋白含量略低一点,,符合情况。:①本次试