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应用变性高效液相色谱快速检测鉴定ㄉ耘嗥分值难芯吴兴海掷杳,谢宏峰甌甌花生是一种重要的粮食作物,在世界农业经济中具有重要的作用。我国是花生种植生产大国,种植区域广泛,培育种类丰富。传统的花生栽培种鉴定除性状描述法外挥嘀钟屑窃,还包括形态学标记、细胞学标记和同工酶标记以及最近二十年来逐渐兴起的肿颖昙羌际醯取А!:推渌锉昙技术发展规律相同,花生肿颖昙茄芯科鹪从谙拗菩阅谇忻钙纬ざ榷嗵退婊┰多态性伞芯浚孀叛芯康纳钊耄琒、6ḿ虻ブ馗葱蛄、婊┰龀ざ多态性昙堑燃际踔鸩降靡杂τ谩А庑┐车姆肿颖昙羌际踉诜⒄怪斜┞读瞬街韪丛印⒑氖背ぁ⑽法达到高通量检测要求等不足。近年来,伴随着交叉科学的快速发展,一些囊括了物理学、化学、生物学的新技术和新仪器不断涌现,凭借其特殊的多功能特点,可同时完成化学成分、生物基因、蛋白等多种靶标的检测,这为生物标记特别是花生品种的鉴定提供了新的平台。变性高效液相色谱壳爸饕S糜诩觳饣蛲槐浼吧查单核苷酸多态性,在医学、食品安全、刑侦、动物育种、微生物检测等领域得到了广泛使用¨¨谏锓肿颖昙茄芯恐形醇ǖ馈1狙芯恳許—际跸谓有滦透咄緿技术,系统地建立种花生栽培品种的指纹图谱快速检测鉴定技术。,山东青岛;蕉』ㄉ芯克蕉嗟鉴定技术。以个花生品种的<觳饽勘辏∪组花生微卫星虻ブ馗葱蛄引物对进行扩增,产物分别采用琼脂糖凝胶电泳和屑觳狻=峁砻鳎蘼鄄捎橐镏腥魏我恢郑碇悄旱缬揪薹ㄗ既非只ㄉ分郑贒检测中,当采用引物组关键词:变性高效液相色谱;检测鉴定;花生品种摘要:研究构建了基于变性高效液相色谱幕ㄉ肝仆计祝⒘只ㄉ耘嗥分挚焖偌觳降落保渌⒌腄指纹图谱能够准确鉴定全部种待测样品。这表明狿—际跄芄成为一种快速、准确的花生栽培品种检测鉴定技术。.,琎,:蟭第卷增刊年月分析测试学报—保琇琗—瑃畐甋—,;;ㄑ蹲髡撸何庑撕#芯糠较颍褐参锛煲撸珽—:.,.
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絮盎。:伲篿三愁彻实验部分实验结果材料与试剂催芽引物设计┰┰鎏逑蛋凑兆芴寤覲/梗嫌我灿。锴碇悄旱缬炯觳觳簧涎浚篜产物印旱缬炯觳饨峁采用山东省育成或鉴定推广的个花生品种,全部由山东省花生研究所馈赠酆厦浮、从撼逡骸:、氯仿、无水乙醇、异丙醇、巯基乙醇陨产品来自上海生工有限公司罅宝生物有限公司籨由实验室纯水系统制备。引物和探针合成由美国鹚谷鹕锕こ逃邢薰完成,纯度级别为分析纯。三乙胺乙酰盐状购自公司;乙腈状购自公司。%乙腈。介质定植将花生种子播种至栽培介质ㄍ,浇灌适量水分以满足种子萌发所需,芤院观察发芽情况。.酥椒ㄔ谂嘌笾蟹湃胧H舐酥剑ɑㄉ肿又糜诼酥缴希巧细亲臃湃肱嘌渲校保湿培养,一周后观察发芽情况。0逯票赣肈提取采用改良法‘根据文献报道陋一∮霉诤凸噬匣生遗传多样性研究中使用较为广泛的榛ㄉ卫星扩增引物,具体序列如表反应体系进行┰龇从Α7从ψ槌桑×甿/和下游引物/各酆厦珼反应模板凡问齌绦颍每循环降循环;鲅罚蛔詈姹N隆用橐锓直鸲员所列种花生品种的模板蠺┰觯玃产物在デ碇悄荷缪瓜碌缬媚撼上褚墙蟹治觥色谱柱:—色谱柱.,粒度穖妫涣鞫啵夯冲溶液ǘ%,缓冲溶液ǘ%,流速/患觳馄鳎河ü饧觳馄光源:疲患し⑵状;发射谱带.;波长将┰霾锇匆陨咸跫直鹬糜贒进样器中,启动程序,自动完成进样、过柱、分析过程,观察检测反应结果图谱。研究选用高浓度琼脂糖凝胶械缬荆峁允荆组引物全