文档介绍：中南大学硕士学位论文编号⋯⋯⋯⋯.分类号⋯⋯⋯⋯⋯..密级⋯⋯⋯⋯~学科专业:研究生姓名:论文题目:导师姓名及其
为了验证删蚅基因在鼻咽癌中的表达水平,我茄拾┳橹纠和￡臁达的验证摘要食等多种因素有关。瘤基因的活化和抑瘤基因的失活是肿瘤发生发展的重要的分子机制之一。在鼻咽癌中,对许多的抑瘤基因研究后发现,一些常见的抑瘤基因,如⑦礘、和只等,瘤基因存在,以及在鼻咽癌中抑瘤基因还有除突变以外的其他失活机一从差异表达谱芯片中筛选的基因的研究因,但是还需通过进一步实验验证这些基因与鼻咽癌的关系及其在鼻缺失或下调,达到%。而且工巧’基因在鼻咽癌组织中的表达与患鼻咽癌琋叻⒂谖夜戏剑且种恶性程度较高的肿瘤,其发病与遗传因素、病毒以及环境和饮很少甚至不发生突变,这提示可能还有一些没被发现的鼻咽癌相关抑制。因此,寻找鼻咽癌相关候选抑瘤基因及探讨其失活的分子机制,将有利于进一步了解鼻咽癌变的机理,对鼻咽癌临床诊断及治疗也将起到重要的作用。基因芯片为分析肿瘤发生发展相关基因及表达程度提供了强有力的工具。高密度表达阵列已成功应用于人类多种疾病的基因表达的研究中,并获得了相应表达谱及发现了许多新的与疾病相关的基因。在鼻咽癌中,也通过基因芯片技术筛选出了很多差异表达基咽癌中的作用。我们以本实验室的四张鼻咽癌芯片的结果为原始数据,结合通过检索和数据库得到的其他肿瘤中表达谱芯片的结果,选取了蚅两个基因作为本实验的研究对象。。实验包括以下五个部分:们用半定量检测了例鼻咽癌组织和例慢性鼻咽炎组织中腿齌的表达水平,发现』基因在鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织中都稳定表达,没有表达水平的差异;￡丁蛟诼员茄恃鬃橹泻愣ū泶铮诒茄拾┳橹腥幢泶锩飨硕士学位论文中文摘要
为L迕苈胗蒀,颖嗦牍劝彼幔鳷ぢ鸦蛲槐涞难芯为了探讨工盯基因启动子区甲基化与鼻咽癌的关系,,椒ḿ觳饬茄拾┳橹捌渑涠酝庵苎V形⑽佬俏坏虶:杂合性缺失情况,结果发现两个位点的丢时有这两个位点的丢失,因此,艿亩J饰ァU馓崾疚卫星位点的杂合性丢失可能对诒茄拾┳橹斜泶锵碌髌鹆艘通过方法和测序分析了工丁蚱舳忧⒌外显子和第庀宰拥耐槐淝榭觥T茄拾┳橹形颐羌觳獾搅似动子区在茄拾┳橹杏型槐洌雌舳忧坏为终止密码。根据我们的分析可以得出,诒茄拾┳橹械耐槐率为.,而且所检测到的突变可能都具有一定的意义:启动子区的突变可能会影响其与反式作用因子的结合,从而导致有可能导致转录的失活。因此,虻耐槐淇赡茏闫湓诒茄拾┲特异性椒ḿ觳饬茄拾┳橹员茄恃鬃橹￡启动子区杭谆榭觯峁允员茄恃鬃橹化。鼻咽癌组织与慢性鼻咽炎组织相比,两者发生工启动子区高甲基化的几率存在明显的统计学差异.;通过分析我们还发现￡砑’启动子区杭谆刖辈苛馨徒嶙R浦浯嬖谙喙匦在有颈部淋巴结转移的患者中基因的表达水平明显低于没有颈部淋巴结转移的患者。茄拾┳橹蠰微卫星位点杂合性丢失失率分别为%/。其中有茄拾┍瓯就定的作用。外显子在茄拾┳橹杏型槐洌渲例在同一位点出现了突变,即贾卤嗦氲陌被嵊杀彼苏氨酸,另外槐湓的转录失活;而第庀宰拥耐槐湮4硪逋槐浜臀抟逋槐洌转录失活的分子机制之一。茄拾┳橹腥舳忧谆刺无⑸谆诒茄拾┳
.。在例￡阿疉表达异常的标本中,有./发生了启动子区的高甲基化。这些结果说明工珂基因表达失活与其的意义,我们选择了、艇脱虶盯基因进行ゼ谆员茄拾┫.ü齊图谆匾煨訮分别检测了处理结果提示:高甲基化能明显抑制鼻咽癌细胞株中基因的表达,而去甲基化后能重新激活或增强该基因的表达。┲械难芯原发性鼻咽癌母叻⑵德是=徊酵ü⑾赴诤系ト旧转移技术的功能性研究将与鼻咽癌发生密切相关的抑瘤基因定位于踔练⑸亢闲远JАW罱琇妊芯恐な翟诜伟┫赴研究,期望能从中寻找与鼻咽癌发生、发展有关的候选抑瘤基因。茄拾┳橹谢騧泶锼降募觳启动子区高甲基化有一定的关联,很可能是鼻咽癌发生发展的原因之的影响系,我们用甲基转移酶抑制剂辉拥R一脱氧胞苷处理鼻咽癌细胞株前和用不同浓度的药物处理细胞后的甲基化和表达水平情况。进一步表明蚱舳忧呒谆苡跋炱鋗泶锼健最近,比较基因组杂交和微卫星多态性位点全基因组扫描的研究结果提示,鼻咽癌患者在最常发生连续性、非随机性杂合性丢失,,其中—、.,。与此同时,大量的研究也证实人类常见的恶性肿瘤如肾癌、肺癌、头颈部鳞状细胞癌、,有个候选的抑瘤基因位于其中。由于仍诒茄拾┫┓⑾值淖钚」餐笔,因此这些肺癌中的候选抑瘤基因可能在鼻咽癌发生发展中起了一定的作用。